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猴头菇多糖的结构表征、免疫调节活性及其机理研究

导  师: 黄惠华

授予学位: 博士

作  者: ();

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 猴头菇(Hericium erinaceus),又名猴头菌、猴头、猴头蘑、对脸蘑,在日本又被称为山伏茸,属于担子菌亚门、担子菌纲、多孔菌目、齿菌科、猴头属。猴头菇富含多种生物活性成分,如猴头菇酮、猴头素、糖蛋白、多糖、生物碱等。作为其中最主要的活性成分,猴头菇多糖具有抗氧化、抗慢性胃炎等生物活性。但是目前对其体内体外免疫活性及机理的研究较少。本课题以猴头菇子实体为原料,对猴头菇多糖的主要组分HEP-W进行了分离纯化、结构鉴定、链构象表征及体内体外免疫活性方面的研究,并以巨噬细胞为靶细胞,深入探讨了HEP-W免疫调节活性的分子机制。主要研究结果如下:(1)通过水提醇沉、Sevage法去蛋白后得到了猴头菇粗多糖,得率为(2.56±0.14)%(w/w)。经过DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换柱层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析对粗多糖进一步分离纯化,得到HEP-W组分。化学结构分析表明猴头菇纯化后的HEP-W多糖组分的平均相对分子量为1.59×10~4 Da;主要是由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为0.98:1.59:0.89:5.60:7.06。综合红外光谱、高碘酸氧化、Smith降解及核磁共振分析,HEP-W的单糖残基类型主要为:(1→)-α-D-葡萄糖,(1→3,6)-α-D-葡萄糖,(1→2,6)-α-D-半乳糖,T-β-半乳糖,(1→3,4)-β-D-甘露糖,(1→3)-α-鼠李糖以及(1→2)-β-L-岩藻糖。热重分析表明HEP-W具有较好的热稳定性,玻璃化转变温度为77.2℃,热分解温度为348.5℃。(2)原子力显微镜显示在溶液中的HEP-W以柔顺性链构象存在,多糖单链的高度约为0.12~1.5 nm,直径约在250~615 nm;X射线衍射与刚果红试验分别表明HEP-W为无定型结构,并且无三螺旋的空间构象;粘度测定结果表明猴头菇多糖溶液表现出典型的假塑性流体行为,且粘度随着质量浓度的增大而升高。(3)内毒素测定结果表明本试验中分离纯化得到的猴�

关 键 词: 猴头菇多糖 结构鉴定 巨噬细胞 免疫调节 环磷酰胺 作用机制

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