导　　师： 杨婉莹;叶明强

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 昆虫缺乏获得性免疫，主要依靠先天免疫（Innate immunity）反应来抵抗外源微生物的入侵。昆虫对病原物的识别是通过体内的模式识别受体（pattern-recognition receptor，PRR）识别病原微生物的病原相关分子模式(pathogen associated molecular patterns， PAMPs)，从而引发自身的免疫反应。其中肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan-recognition protein;PGRP）是昆虫体内最重要的模式识别受体之一。　　对黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）中的PGRP研究发现，PGRP可以分为S型和L型，它在识别细菌胞壁组份肽聚糖（peptidoglycan，PGN）后，可以激活下游体液免疫信号通路、参与酚氧化酶原级联反应、利用其酰胺酶活性降解细菌以及参与细胞自噬等多条通路。　　本实验室在前期研究中发现，用高剂量DAP-PGN注射家蚕（Bombyx mori）后，其脂肪体细胞发生细胞自噬。这暗示着家蚕BmPGRPs可能参与了PGN的识别并引发下游的细胞自噬反应。家蚕全基因测序完成后，通过生物信息学分析发现，家蚕中存在12条 BmPGRPs，6条 L型，6条 S型。那么究竟是哪一条 BmPGRPs参与识别DAP-PGN并引发细胞自噬呢？　　本研究以家蚕为对象，通过生物信息学分析了家蚕中BmPGRPs的进化关系，预测其保守功能结构域。并通过RT-PCR扩增获得全长基因，克隆至真核生物表达载体上，转染果蝇S2细胞。获得的主要研究结果如下：　　（1）根据家蚕基因数据库及NCBI上的最新数据，BLAST分析发现家蚕中有11条 BmPGRPs蛋白，5条 L型，6条 S型。对其进行进化树分析，结果显示家蚕BmPGRP-L1/-L6和PGRP-S1/-S2形成一个分支，剩余的BmPGRPs聚在一起形成另外一个分支。从进化树距离分支的长度看，BmPGRP-L1出现最早，其次是BmPGRP-L2、BmPGRP-L4、BmPGRP-L5，最后是BmPGRP-L6。BmPGRP-L1和BmPGRP-L6与果蝇DmPGRP-LE/-LC的亲缘关系较近。　　（2）对L型BmPGRPs的结构域

关 键 词： 病原微生物 模式识别 肽聚糖识别蛋白 昆虫细胞 家蚕基因测序

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