导　　师： 李晓凤

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 黄酮类化合物具备抗菌、抗炎、抗过敏、抗癌、抗氧化等多种生理功能,广泛应用于食品、医疗和化妆品等行业。其中芦丁、柚皮苷等作为一类重要的黄酮类化合物备受关注。已有研究发现,此类化合物经去糖基化修饰所得降解产物异槲皮苷、柚皮素等在抗菌、抗癌等方面具有较原化合物更强的生理活性,也具有极高的经济价值。自然界中,此类化合物存量很少,通过化学法催化黄酮类化合物的去糖基化反应是目前制备此类化合物的主要方法。由于黄酮有多个糖基,化学法以及酶-化学结合法均需要多步保护和去保护步骤,才能使得特定位置的糖苷键发生断裂,脱去特定的糖基,得到相应苷元或中间体。近年来新兴起的酶法可以避免化学法的弊端,但存在酶制剂成本高、稳定性也相对较差等缺点。针对上述问题,本研究探讨了全细胞催化以芦丁、柚皮苷为代表的黄酮类化合物选择性水解反应,来制备相应黄酮苷元或其中间体;全面研究了微生物菌株种类、培养基组分以及反应介质对全细胞催化剂催化特性及该全细胞催化反应的影响及其机理;建立起了高效、绿色的黄酮苷元及其中间体制备的最佳反应体系。在所筛选的14株微生物菌株中,黑曲霉(Aspergllus niger GIM 3.25)、施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri GIM 1.273)的全细胞催化剂均显示了催化芦丁水解反应的能力,其中黑曲霉的催化活性高于施氏假单胞菌,且能专一性地水解芦丁生成异槲皮苷。以黑曲霉细胞为生物催化剂,在最优反应条件下(反应时间为72 h、反应温度35℃、缓冲体系pH 5.0、转速120 r/min和全细胞剂用量60 mg),黑曲霉催化芦丁水解反应可选择性地生成异槲皮苷,最高转化率>99%。操作稳定性研究表明,黑曲霉全细胞催化剂重复使用10批次时仍保持88%的底物转化率,显示了较高的操作稳定性。研究发现,培养基成

关 键 词： 黄酮类化合物 水解反应 黑曲霉 全细胞催化 柚皮苷 芦丁 混合溶剂

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