导 师: 亓文宝
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 华南农业大学
摘 要: 禽流感属于1类传染病,其中H9N2亚型禽流感病毒是家禽中流行范围较大、危害比较严重的禽类传染病之一,主要是感染蛋鸡、种鸡和商品肉鸡等。我国在1994年首次公开报道后,H9N2亚型禽流感病毒就在鸡群中呈大范围流行分布,已给我国养禽业带来巨大经济损失。由于流感病毒易发生变异与重组,H9N2亚型禽流感病毒能为出现感染人的H5N1、H7N9、H10N8和H5N6亚型禽流感病毒提供内部基因重配,潜在威胁人类健康安全,从1994年至今,我国至少有13例人感染H9N2病例报道,表明H9N2亚型流感具有重要公共卫生意义。为了持续监测H9N2亚型禽流感病毒的流行变异,本研究对20142017年中国华南、华中及西南地区分离的30株H9N2亚型禽流感病毒进行纯化后,进行HA和NA基因测序及序列分析和遗传进化树构建,以掌握发病鸡群中H9N2亚型禽流感病毒的遗传变异方向,依据HA序列遗传系统进化树,选择在的在来源、年份及区域、不同分支的6株代表毒株,进行单因子血清制备,通过血清交叉HI试验和鸡胚交叉中和试验结果进行分析,以此来研究近年来H9N2分离流行株之间是否存在抗原性差异分化情况,并筛选出候选疫苗株CK/HN/15347/2015和CK/SD/WHKY/2014制备灭活疫苗,最后进行免疫攻毒保护实验,评价2株毒株的免疫保护效果。遗传进化分析表明:30株H9N2亚型禽流感病毒均源于CK/Bei-like,属于以A/Duck/HongKong/Y280/97株为代表的H9.4.2谱系的H9.4.2.5分支,HA基因裂解位点PSRSSR/GLF,在裂解位点处只有1个碱性氨基酸,属于低致病性禽流感病毒的特征;HA基因受体结合位点在198位点上有7株毒株出现V/A的差异,30株的第226位氨基酸都是谷氨酰胺(Q),人流感受体结合特性未有呈现;NA基因颈部都存在9个核苷酸的缺失,6365位点三个氨基酸缺失。血清交叉HI试验和鸡胚交叉中和试验结果表明:选取的6株H9N2亚型禽流感病毒中CK/SD/WHKY/2014