导　　师： 李荷

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广东药科大学

摘　　要： 现已发现的纤维素降解菌所产纤维素酶大部分酶活力不高,酶学性质无法满足工业上大规模发酵生产的必要,纤维素酶的价格居高不下,我国的纤维素酶大都依赖进口,自己的生产技术与生产效率不高。本论文从源头开始,在自然界纤维素丰富的环境中,筛选能够高效产纤维素酶的微生物。纤维素酶在多种领域都具有良好的应用,本论文分析了其在提取中药虎杖中有效成分白藜芦醇和白藜芦醇苷以及在水葫芦资源化利用中的实际价值。从不同环境中通过刚果红染色初筛、酶活测定复筛,一共筛选出16株产纤维素酶的菌株,其中产生羧甲基纤维素酶活（CMCase）、滤纸酶活（FPase）和β-葡萄糖苷酶活（βGase）活力最大的分别是H-3、H-3和H-1菌株,酶活力分别为1538.44 U/ml、212.87 U/ml和115.14 U/ml。选择其中3种水解圈较大、所产纤维素酶的酶活力较高的菌株（H-3、Z-1和Z-2菌株）进行16S rDNA基因序列分析,鉴定均为芽孢杆菌（Bacillus）。对3种菌株所产纤维素酶的酶学性质进行了分析,发现H-3、Z-1和Z-2菌株所产酶的最适温度均为50℃,最适pH分别为5、4和5。3种菌株产生的纤维素酶耐热耐酸稳定性良好,在4℃-50℃保温4h后还有50%以上的剩余酶活;pH 3-7处理4h后,剩余酶活力均在40%以上。3种菌株所产纤维素酶的酶学性质良好,通过合理运用可以提高其酶学活力。对筛选得到的高效纤维素降解菌——H-3菌株的发酵产酶条件进行了优化。利用单因素试验、Plackett–Burman实验设计和响应曲面设计对菌株产纤维素酶的发酵条件进行了优化。实验主要以CMCase为指标,评价了碳源、氮源、无机盐、起始pH值、接种量和装液量6个因素对菌株产酶能力的影响,得出酵母粉、装液量和起始pH为主要显著性影响因素,通过Design-Expert软件分析出菌株产酶最佳发酵条件是酵母粉含量为20.92g/L、装液量52.51mL、

关 键 词： 纤维素酶 响应面法 白藜芦醇苷 白藜芦醇 水葫芦

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