导　　师： 李贵涛

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的:通过使用黄酮类化合物槲皮素治疗大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI),验证其治疗效果,并探讨其可能的作用机制。方法:取128只成年健康雌性SD大鼠,随机等分为对照组、干预组、治疗组和假手术组。对照组、干预组及治疗组大鼠使用自制脊髓损伤打击器建模:常规麻醉并消毒,摘除T9-T11椎板后暴露相应脊髓节段,采用10g×25mm致伤势能对脊髓进行垂直打击建模。治疗组及干预组大鼠于术后1h给予腹腔注射槲皮素(25μmol/kg,12h/次),持续7日;干预组大鼠在注射槲皮素后立即在对侧腹腔注射p38MAPK特异性激活剂anisomycin;假手术组大鼠仅行椎板切除术。对照组及假手术组大鼠术后予以与治疗组等量、等频率的生理盐水腹腔注射。大鼠建模成功后按摩膀胱排尿3次/日,直到恢复反射性膀胱;术后7日内所有大鼠行氨苄青霉素腹腔注射预防感染。术后1d、3d、7d、14d、21d及28d对各组大鼠进行BBB评分。术后3d、7d、14d及28d时每组随机取8只大鼠麻醉并行心脏灌注,灌注成功后切取长约1cm的脊髓组织,纵切为均匀的左右两半,取其中一半保存于-80℃冰箱,以备行Western blot蛋白检测,另一半组织在4%多聚甲醛中浸泡24h用于免疫组化或HE染色。术后28d对各组大鼠脊髓组织进行HE染色并在显微镜下观察。术后3d、7d、14d及28d对各组大鼠脊髓组织的胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经丝蛋白-200(neurofilament protein-200,NF-200)进行免疫组化染色,显微镜下观察,统计分析各组的阳性细胞数目。术后3d、7d、14d及28d对各组大鼠脊髓组织的p38MAPK、磷酸化p38MAPK(phosphorylation p38MAPK,p-p38MAPK)蛋白的表达情况进行Western blot检测,术后28d对各组大鼠脊髓组织的GFAP和NF-200蛋白进行Western blot检测。结果:术后7d、14d、21d及28d,治疗组大鼠BBB评分显著高于对照组与干预组(P<0.05)。术后3d和7d各脊髓损伤组的p38MAPK磷酸化水平明显高于假手术组(P<0.05),治疗组的磷酸化水平在术后3d、7d及14 d时明显低于对照组与干预组(P<0.05)。各脊髓损伤组在术后各时间点NF-200和GFAP阳性细胞数均高于假手术组(P<0.05),治疗组的NF-200阳性细胞数较对照组和干预组显著增高(P<0.05);术后7d、14d和28d,治疗的GFAP阳性细胞数明显低于对照组与干预组(P<0.05)。结论:槲皮素通过抑制急性脊髓损伤后p38MAPK信号通路的激活,促进了 NF-200的表达及神经元轴突再生,抑制了 GFAP表达及星形胶质细胞的增生、阻碍了胶质瘢痕的形成,修复受损脊髓的神经传导作用,从而促进急性脊髓损伤后运动功能的恢复。更多还原

关 键 词： [3706972]槲皮素 [5733162]脊髓损伤 [100491044]P38MAPK [5923986]胶质纤维酸性蛋白 神经丝蛋白-200

分 类 号： [R651.2]

领　　域： []