导　　师： 刘云岗

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 有机致癌物自身通常缺乏生物反应性，需要经过代谢活化才具有致突变和致癌性。化学物的致突变性筛查通常采用体外细胞遗传毒理学试验，然而，由于常规细胞缺少生物转化酶活性，易致假阴性结果。采用体外代谢活化系统（如大鼠肝脏S9混合物）可增加致突变物的检出率。然而，某些重要的代谢酶在肝细胞中并不表达或者表达量不受常用诱导剂（如Aroclor1254）影响，导致依赖相应酶活化的前致突变物在添加S9混合物的实验体系中也表现为阴性结果。采用重组表达特定细胞色素P450(cytochrome P450，CYP)酶的细胞系作为遗传毒性研究的实验体系可明显增加前致突变物的检出率。CYP2E1是活化某些亲脂性小分子化合物的重要代谢酶，表达该酶的各种细胞模型已被用于研究相关前致突变物的遗传毒作用，然而关于细胞内表达代谢酶的实验体系与细胞外添加S9混合物的活化体系的比较优势尚未见报道。N-二乙基亚硝胺(NDEA)是重要的食品污染物及肝脏诱癌剂，在缺乏代谢酶活性的实验体系中遗传毒性试验结果为阴性，只有在添加S9混合物并采用高浓度处理才表现致突变作用。有研究提示其可能经CYP2E1酶代谢活化。本研究采用表达人CYP2E1酶的重组中国仓鼠(V79)细胞和人肝(L-02)细胞研究NDEA的遗传毒性及其对CYP2E1酶的依赖性，并将其与在S9混合物作用下对缺乏代谢活性的V79-Mz（无CYP酶表达）细胞的效应进行比较，以探讨细胞内酶表达体系用于体外遗传毒性研究的优势。　　由于CYP2E1的底物一般为有机物，试验中需要有机溶剂助溶。然而，据报道常用的有机溶剂二甲基亚砜(DMSO)可抑制CYPs酶活性，其中以对CYP2E1酶的作用最强;而其他许多有机溶剂（如甲醇、氯仿、丙酮等）不巧却均为CYP2E1底物，不适合作为相关遗传毒性试验的受试物助溶剂。DMSO是否会影响

关 键 词： 二乙基亚硝胺 酶 遗传毒性 多氯联苯 基因突变