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酶法制备二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸单乙醇酰胺

导  师: 王永华; 曹昱

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 二十碳五烯酸单乙醇酰胺(eicosapentaenoyl ethanolamide,EPEA)和二十二碳六烯酸单乙醇酰胺(docosahexaenoyl ethanolamide,DHEA)是一种重要的内源性脂质信号调节分子,研究表明其具有免疫调节、促进大脑发育和抗癌等生物学功能,有望成为一种重要的治疗药物。但EPEA和DHEA在动物组织中的含量较低、结构不稳定,并且难于实现大量提取获得。而高含量、高纯度的EPEA和DHEA高效合成制备方法目前尚未有报道。本研究以天然低共熔溶剂(natural deep eutectic solvents,NADES)作为反应溶剂,采用商品化脂肪酶Novozym 435为催化剂,建立了一种高效的酶法合成EPEA和DHEA的方法,以期推动EPEA和DHEA的功能性研究和相关产品的研发。本论文的主要研究内容及结果如下:(1)研究了不同NADES溶剂类型对酶法合成EPEA和DHEA得率的影响。结果表明,在Novozym 435添加量为2195 U、温度为60°C、时间为3 h的反应条件下,相对于其他NADES溶剂体系,氯化胆碱-葡萄糖(choline chloride:glucose=5:2,mol/mol,CG)NADES溶剂中以乙酯型鱼油与单乙醇胺为底物催化合成EPEA和DHEA的得率达到最高:分别为91.51%及74.22%。研究结果还表明Novozym 435对二十碳五烯酸乙酯的催化选择性优于二十二碳六烯酸乙酯,尤其在氯化胆碱-丙二酸(choline chloride:malonic acid=1:1,mol/mol,CM)NADES溶剂中,反应5 h后,EPEA和DHEA的比值可达到2.09。(2)研究了氯化胆碱-葡萄糖(CG)NADES体系中水分含量对酶法合成EPEA和DHEA得率的影响。研究表明,与无水的CG NADES体系相比,CG NADES体系中的水分含量显著提高了酶催化的初始效率。当CG NADES体系中含水量为8.5%,在Novozym 435添加量为2195 U、时间为1 h、温度为60°C的反应条件下,EPEA和DHEA得率分别较无水CG NADES体系提高了14.42%和32.08%。(3)研究优化了氯化胆碱-葡萄糖-水(choline chloride:glucose:water=5:2:5,mol/mol/mol,CG-8.5%water)NADES体系中EPEA和DHEA的制备条件。评估�

关 键 词: 天然低共熔溶剂 二十二碳六烯酸单乙醇酰胺 二十碳五烯酸单乙醇酰胺 酶法合成 分离

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