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海鲈虹彩病毒感染的病理组织学研究及快速诊断方法的建立

导  师: 李玉谷;刘振兴

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 自上世纪80年代年以来,中国水产养殖产量已连续30年位居世界第一。其中海鲈(Lateolabrax maculatus)养殖占比较大,据《中国渔业统计年鉴2018》可知,我国海水鱼养殖产量为141.93万吨,其中海鲈产量为15.66万吨,位居海水鱼第二。而随着海鲈养殖规模的不断扩大,病毒性疾病严重制约着海鲈养殖业的发展,前期实验中我们分离到一株海鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV),命名为LMIV1706。该病毒具有较强的毒力,剖检发病海鲈可见其内脏器官脾脏、肾脏和肝脏等严重出血肿大。对海鲈虹彩病毒感染的病理组织学进行研究以及建立一种快速、灵敏、适合基层临床诊断的检测方法对该病毒的致病机制以及防控具有重要意义。本研究开展以下两部分工作:一、通过病理组织学研究分析虹彩病毒感染海鲈后的病理组织学特点,HE切片染色观察到发病海鲈的主要脏器特别是造血器官脾脏严重出血、炎性细胞浸润、坏死;肝脏肿胀出血,肝小叶界限不清晰,出现大量空泡变性,且都出现大量的嗜碱性的肿大细胞,上述研究为进一步解析海鲈虹彩病毒感染的组织、器官嗜性,阐明致病机制提供了基础。二、利用交叉引物恒温扩增技术,针对海鲈虹彩病毒高保守区ATPase基因设计CPA引物,结合一次性核酸检测试纸条,优化反应体系和反应条件,建立可视化检测LMIV的交叉引物恒温扩增检测方法(Cross priming amplification,CPA)。结果表明,本研究建立的LMIV-CPA方法的最佳反应温度为62℃,最佳反应时间45 min,扩增产物配合一次性核酸试纸条检测装置进行检测,在3~5 min内即可肉眼判读结果。本研究用建立的LMIV-CPA方法特异性良好,不与其他水生常见病毒锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、鲤浮肿病毒(Cyprinus edema virus,CEV)、中华鳖虹彩病毒(Soft-shelled turtle iridovirus,STIV)、斑点叉尾鮰疱疹�

关 键 词: 虹彩 病毒感染 病理 组织学研究

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作者 朱小波
作者 赖方亮

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机构 北京理工大学珠海学院
机构 南方医科大学

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