导　　师： 全世建

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 目的:　　五味子是一种传统中药，来源于木兰科的植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.) Baill.的干燥成熟果实，习称为“北五味子”，而木兰科华中五味子Schisandrasphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果实则称为“南五味子”。五味子中含有不少的多糖成分，多糖又称为碳水化合物，其通用的分子式为(CH2O)n。五味子多糖大多具有抗氧化、抗衰老的作用，在体内可以保护人的肾脏、肝脏。目前已有文献中对五味子多糖抗氧化和衰老方面的研究并不深入，尤其是对其作用机制的研究更是少之又少，因此探究五味子多糖产生的抗氧化作用及其作用机制具有不小的意义。NF-E2(Nuclearfactor erythriod2-related factor2，Nrf2)目前已经被证明是与抗氧化作用最密切相关的靶标之一，当体内、外受到氧化应激等相关刺激后，Nrf2在细胞浆中与Keap1迅速地解离开来并被活化，接着Nrf2从核外向核内运动。本实验以人胚肾细胞293T为模型，研究北五味子多糖对293T细胞的抗氧化、增殖作用的影响以及作用机制，为氧化应激、衰老的预防和治疗提供新的思路和方向，也为北五味子多糖开发出相关的食品、药品提供理论依据。　　方法:　　1.细胞的培养　　按照常规方法培养293T细胞株，培养液按如下比例配制:DMEM高糖培养基∶FBS∶青链霉素混合液=(45ml∶5ml∶500ul)，于恒温37℃，恒量含5％CO2的细胞培养箱内每天观察细胞生长情况，传代培养。　　2.北五味子粗多糖(SCP)的提取、分离、纯化　　到药店购买北五味子的药材，经过石油醚脱脂后得到水提粗多糖，经过脱色、脱蛋白及过DEAE-52、sephadexG-100层析柱进行分离、纯化得到一个纯化的多糖组分，收集液冻干成粉末后在冷冻干燥的条件下保存。　　3.北五味子多糖的抗氧化作用　　根据SOD、CAT、MDA、GSH含量或活性检测试剂盒的说明�

关 键 词： 北五味子多糖 分离纯化 抗氧化作用 细胞

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