导　　师： 毛丽梅

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景与目的：脂联素是防治肥胖及相关疾病极具价值的分子靶点。PUFA对脂联素的调节一直备受关注，现有研究提示n-3、n-6PUFA对脂联素的影响很可能不同，但无直接证据。因此，本研究拟在正常及炎症状态下比较n-3、n-6PUFA调节脂联素的效应差异，并首次从PPARγ、CDK5/p-PPARγ两条信号通路探讨二者调节脂联素的分子机理，试图揭示n-3、n-6PUFA作用差异的产生原因。其结果将为合理摄入PUFA提供新的科学依据，为预防和治疗肥胖等疾病提供新思路。　　方法：3T3-L1前体脂肪细胞100％融合后加入地塞米松、胰岛素、IBMX，诱导分化至≥80％细胞变为成熟脂肪细胞。　　正常状态：100μmol/L n-3(EPA、DHA、α-ALA)、n-6PUFA(LA、AA)作用于脂肪细胞24h;n-3、n-6PUFA加或不加GW9662作用于脂肪细胞24h;EPA、α-ALA、LA作用于脂肪细胞24h后加或不加roscovitine继续培养2h;DHA、AA作用于脂肪细胞24h后加或不加TNF-α继续培养2h。　　炎症状态：100、200、300μmol/L PA作用于脂肪细胞24h;PA加或不加罗格列酮作用于脂肪细胞24h;PA作用于脂肪细胞24h后加或不加roscovitine继续培养2h;PA与100μmol/L n-3、n-6PUFA共同作用于脂肪细胞24h。　　Real-time RT-PCR、Western blot、ELISA、Co-IP测脂联素、PPARγ、p-PPARγ、CDK5、p-CDK5、IL-6、MCP-1、TNF-α含量，CDK5与PPARγ相互作用。　　结果：正常状态：n-3PUFA可升高脂联素及PPARγ含量，n-6PUFA中LA仅升高脂联素、PPARγmRNA，AA对二者无影响。PUFA中加入GW9662会抑制PPARγ及脂联素的表达。EPA、α-ALA、LA增加p-PPARγ含量，roscovitine可抑制三者对PPARγ磷酸化的促进来轻度增加脂联素表达;DHA、AA降低p-PPARγ含量，TNF-α可阻遏二者对PPARγ磷酸化的抑制来减少脂联素表达;EPA、α-ALA及LA增加CDK5活性、CDK5与PPARγ相互作用，DHA、AA与之相反。　　炎症状态：200μmol/L PA最能增加IL-6及MCP-1含量。PA抑制脂

关 键 词： 脂联素 蛋白表达 多不饱和脂肪酸 调节机制 分子机理

领　　域： []