导　　师： 许喜林;王小玉

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 肠出血性大肠埃希氏菌主要通过食用被污染的食品传染给人类,可引起严重的食源性疾病,由其引起的感染性疾病流行和暴发许多国家均有报道。世界卫生组织1997年已将肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7列为新的食源性疾病病原菌,该菌是与公共卫生和食品安全有关的最重要的肠出血性大肠埃希氏菌的血清类型;另外O26、O45、O103、O104、O111、O121和O145这七种血清型也是常见的肠出血性大肠埃希氏菌血清型。因此本项目对这七种非O157肠出血性大肠埃希氏菌和肠出血性大肠埃希氏菌O157进行研究,主要研究内容和结果如下:本研究针对O26、O45、O103、O104、O111、O121和O145七种非O157肠出血性大肠埃希氏菌和肠出血性大肠埃希氏菌O157的11个特异性基因设计引物,所有11对引物的单重PCR均扩增出的产物与引物设计预期长度一致的清晰目的条带、无杂带,同时利用这些引物建立了检测食品中肠出血性大肠埃希氏菌4个多重PCR体系,优化了反应体系及条件,验证了引物的特异性,并对该方法的灵敏度进行了研究。方法实现了对上述8种血清型肠出血性大肠埃希氏菌的高特异、高灵敏度的同步、快速检测,弥补了传统方法耗时费力、步骤繁琐等不足之处。本方法建立的4个多重PCR体系,实际应用中可根据食品基质类型灵活选择。本研究对339份食品样品进行了肠出血性大肠埃希氏菌血清型的检测,结果显示该批样品中O45血清型和O145血清型检出率较高分别为11.5%和9.1%。毒力基因检测中检出同时含有3种毒力基因的样品比率为2.4%,毒力基因stx2的检出率20.1%远高于stx1的检出率4.4%,检出同时含有eae、stx2两种毒力基因的样品比率为15.9%,高于同时含有eae、stx1两种毒力基因的样品比率1.5%。检出七种非O157肠出血性大肠埃希氏菌的比率10.3%,高于O157肠出血性大肠埃希氏菌的比率0.9%。研究结果表明:�

关 键 词： 肠出血性大肠埃希氏菌 多重 特异性 灵敏度 检测方法

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