导　　师： 杨礼香

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 广州大学

摘　　要： 植物处于一个复杂多变的生态环境,常常遭受许多逆境胁迫。植物多肽激素是植物中主要的一种信号分子,调控植物的生长发育进程。快速碱化因子(rapid alkalinization factor,RALF)是在植物界中普遍存在的一种植物多肽激素,可以使培养基pH快速上升,并介入调控植物的生长发育。本研究构建了香蕉cDNA酵母表达文库,并从文库重组质粒中分离鉴定出了MaRALF基因,采取生物信息学、基因表达分析、酵母互补实验、原核表达蛋白等方法对MaRALF基因功能进行了初步的探讨,主要结果如下:(1)RALF来源于一个大家族基因,属于一类小分子信号肽蛋白,通过前体蛋白加工修饰而成。大多数前体蛋白N-端序列不保守,而C-端保守性较强并包含有YIXY、YXRGC基序,且由四个半胱氨酸残基形成两个二硫键。(2)基因表达结果表明,香蕉MaRALF能够参与激素(GA、ABA)、氧化胁迫(甲精紫精)、渗透胁迫(甘露醇)、低温(4℃)等诱导,可以作为胁迫响应基因,介入植物对逆境胁迫的应答。MaRALF的基因表达量在不同胁迫处理下有不同的表达,其中包括ABA、重金属Cd胁迫等诱导能使MaRALF基因表达量在叶子中得到上调,而其在根中的基因表达量却是下调。此外,MaRALF应对重金属、高盐胁迫的基因表达量大于温度的表达量。表明MaRALF可能作为一种防御基因,介入调控香蕉的生长发育,参与香蕉响应逆境环境胁迫的应答。(3)本实验构建了香蕉原核蛋白表达载体GST-MaRALF,转化大肠杆菌BL21并诱导得到分子量约为38 kDa的重组蛋白;将GST-MaRALF重组蛋白添加到生长了7d的拟南芥幼苗根部,以检测GST-MaRALF重组蛋白对拟南芥根长的影响。结果表明该重组蛋白能够明显抑制拟南芥幼苗根长,表明获得的重组蛋白具有抑制拟南芥根长的功能,能够参与调控植物的生长发育。同时通过诱导GST-MaRALF重组蛋白在大肠杆菌BL21中应对重金属Cd、�

关 键 词： 香蕉 克隆 表达分析

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