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文献详细Journal detailed

小麦胚芽蛋白的免疫活性评价及球蛋白免疫活性肽的结构鉴定与机理研究

导  师: 吴晖

授予学位: 博士

作  者: ;

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 小麦(Triticum aestivum Linn.)是世界上种植最广泛的农作物之一。胚芽是小麦籽粒的生命源泉,虽然仅占麦粒重量的2%,却具有极高的营养价值和药用价值。在小麦胚芽中,蛋白质含量丰富,约占脱脂小麦胚的30%。本课题利用Osborne法将麦胚蛋白分为四种,分别是清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,通过体外细胞实验评价四种蛋白的免疫活性,成功筛选出具有高免疫调节活性的蛋白。同时对免疫活性低,但是含量与营养丰富的球蛋白进行酶解改性,获得一种高免疫活性的粗肽AH。对AH进行分离纯化、结构鉴定,最终获得高纯度免疫活性肽P3-1-1。对P3-1-1的免疫机理进行了初探;同时又对所获免疫活性肽的抗炎和抗红细胞溶血的活性进行了研究。实验结果如下:麦胚的四种蛋白中,谷蛋白的免疫活性最高,但是它在麦胚中占的比例较少,溶解性较差,蛋白消化率最低;而清蛋白虽然免疫活性略低于谷蛋白,但是它在麦胚中占的比重最大,溶解性和蛋白消化率均优于谷蛋白,可以作为良好的植物蛋白源进行开发利用。球蛋白在麦胚中占的比重仅次于清蛋白,但是免疫活性仅仅高于醇溶蛋白,经过碱性蛋白酶酶解3h后(AH),免疫活性大大提高,其对RAW 264.7细胞的吞噬能力,分泌一氧化氮(NO)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的能力分别比酶解前提高了72%、37.73%、203.86%、87.72%和127.25%。AH的水解度和疏水值分别是19.07%和5985.17。AH除溶解性高于酶解前的球蛋白外,其它功能特性均低于球蛋白;经过体外模拟胃肠消化后,在胃蛋白酶消化阶段(APH),免疫活性下降幅度较大,再经过胰酶消化后(APPH),免疫活性有所升高,虽然无法达到胃肠消化前的水平,但是仍具有较高免疫活性。AH经过Diethylaminoethyl(DEAE)sepharose Fast Flow交换层析,得到四个峰,其中P3免疫活性最高;P3经过Sephadex G-15分离纯化,�

关 键 词: 麦胚蛋白 多肽 免疫调节 水解度 疏水性 抗炎 抗红细胞溶血

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