导 师: 余斌
授予学位: 博士
作 者: ;
机构地区: 南方医科大学
摘 要: 目的: 骨质缺损是临床治疗的难点,目前迫切需要研究新型的人工骨替代材料。本实验室前期研究显示α半水硫酸钙/纳米羟基磷灰石(α-C SH/n-HA)复合材料具有良好的生物相容性和骨传导性,但骨诱导性能较弱。因此,本课题创新性地将骨诱导性能良好的槲皮素(Quercetin)与α-CSH/n-HA复合,以期得到一种性能更为理想的新型材料。 方法: 1.材料的制备与性能检测 机械混合法制备Q-α-CSH/n-HA。X-ray衍射实验(XRD)、傅里叶红外扫描(FTIR)、扫描电镜(SEM)、压强实验及X-ray能谱分析(EDX)分别检测材料的晶体结构、表面特征、机械强度及元素构成;体外降解实验及Ca2+与Quercetin浓度测定。 2.BMSCs细胞实验 制备材料浸提液并检测Ca2+与Quercetin浓度;MTT法、CCK-8法及划痕实验分别检测细胞毒性、增殖情况及迁移能力;qRT-PCR检测成骨分化基因表达;茜素红及von kossa染色检测成骨矿化能力。 3.动物实验 分别建立年轻与年老两批SD大鼠胫骨临界性骨缺损模型并植入Q-α-CSH/n-HA(0%、0.5%、1.5%和3%)。X-ray和micro-CT检测骨缺损修复和新骨形成;HE、Goldner及Safranin O染色观察新骨生成及材料降解情况;免疫荧光法观察RUNX2/OSX/OCN阳性细胞数;CFU法检测克隆集落形成能力;测定大鼠血清Ca2+浓度。 结果: 1.XRD、FTIR及EDX结果显示Q-α-CSH/n-HA的衍射光谱、红外光谱及元素构成与α-CSH/n-HA类似,但降解后的材料元素构成更复杂;SEM显示Quercetin的加入增加了材料的微球数目,降解后孔隙率明显增加;Quercetin的加入导致材料机械强度递减,但仍高于正常人体松质骨水平;Quercetin对复合材料的降解速度及降解液中Ca2+水平无明显影响,但Quercetin浓度递增。 2.随着Quercetin比重的增加,浸提液中Ca2+浓度无差异,Quercetin浓度递增,大鼠BMSCs增殖率增加,迁移能力增强,T