导 师: 刘冰;王赫
授予学位: 硕士
作 者: ;
机构地区: 广东药科大学
摘 要: 目的:肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是居世界第五位的常见肿瘤,占世界癌症死亡人数的9.1%。我国是肝癌的高发国,占世界肝癌死亡总数的45%。Ferroportin1(FPN1)是目前已知的唯一一个将细胞内的铁转向细胞外的细胞膜蛋白。有研究表明FPN1与肿瘤发生发展密切相关,但是FPN1与肝癌发生关系的研究目前还处于空白。本课题从临床标本、细胞水平研究FPN1的表达与肝癌患者预后的相关性;研究FPN1对肝癌细胞恶性进展的影响;探究FPN1调控肝癌细胞恶性进展的作用机制。方法:(1)利用Oncomine数据库分析多种肿瘤组织及相应的癌旁组织中FPN1 mRNA的表达,免疫组化检测人肝癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌以及胃癌肿瘤组织和癌旁组织中FPN1蛋白的表达,研究FPN1在不同肿瘤中的表达分布情况。(2)根据随访肝癌患者的生存时间及FPN1蛋白在人肝癌组织中的表达结果,做出相应的kaplan-meier曲线,并分析结果。(3)通过慢病毒转染构建稳定过表达以及低表达FPN1的HepG2和SMMC7721肝癌细胞株,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)以及蛋白免疫印记(Western blotting)检测FPN1的表达情况;(4)在稳定过表达以及低表达FPN1的HepG2和SMMC7721细胞中,EDU实验、生长曲线、平板克隆形成实验研究FPN1对肝癌细胞增殖的影响,基质胶侵袭实验、划痕实验研究FPN1对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响;(5)在稳定低表达FPN1的HepG2和SMMC7721细胞中,Western blotting检测AKT、STAT3蛋白通路的表达;加入AKT、STAT3抑制剂后,MTT实验检测肝癌细胞增殖。结果:(1)经Oncomine数据库分析,结果显示FPN1 mRNA在神经系统性肿瘤、食管瘤、淋巴瘤、畸胎瘤及结直肠癌中表达上调,在白血病、前列腺癌、肺癌、结直肠癌淋巴瘤中表达下调。免疫组化结果显示FPN1蛋白在五种不同肿瘤中表达有不同程度的下调,但是仅在肝癌及乳腺癌中有统计学差异;kaplan-meier曲线结果显示FPN1低
关 键 词: 增殖