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文献详细Journal detailed

猪的三个脂代谢相关基因的启动子克隆和品种间比较

导  师: 江青艳

授予学位: 硕士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 脂肪沉积对猪的胴体品质与肉品质具有重要影响。研究表明,SCD1(硬脂酰辅酶A去饱和酶1)、LIPIN1(磷脂酸磷酸酶1)和DGAT2(二脂酰甘油酰基转移酶2)和是脂代谢的三个关键酶。SCD1在棕榈油酸和油酸的双键形成过程中发挥着重要作用,同时为甘油三脂的合成提供脂酰辅酶A。LIPIN1可为甘油三脂合成的最后一步提供二脂酰甘油,最终在DGAT2的催化作用下形成甘油三脂。同时,LIPIN1还是某些下游基因的转录辅活因子。本实验室的前期研究发现,瘦肉型猪和中国地方品种猪的脂肪沉积存在显著差异,而且上述三个基因在表达量上也存在明显的品种间差异。迄今,对这三个基因的研究主要集中在营养物质对表达水平的调控上,而对基因启动子的研究鲜有报道,上述三个基因的启动子序列尚不清楚,鉴于启动子对基因的表达具有重要的调控作用。为了深入揭示瘦肉型猪和中国地方品种猪之间脂肪沉积存在显著差异的分子机制,本试验克隆了长白猪和蓝塘猪SCD1、DGAT2和LIPIN1三个基因的启动子,并进行了品种间比较。在此基础上进一步构建了两类长白猪和蓝塘猪的LIPIN1启动子5’端序贯缺失的报告基因载体,分析了序列差异对LIPIN1基因转录活性的影响。研究结果如下:  1.克隆了长白猪和蓝塘猪SCD1、DGAT2和LIPIN1三个基因的启动子,获得两个品种长约1700bp的SCD1启动子序列、长约2100bp的DGAT2启动子序列和长约2900bp的LIPIN1启动子序列。比较了这三个启动子在两个品种间的序列差异:发现DGAT2的启动子序列非常保守,仅有2处单核苷酸突变和1处不同长度的poly A;SCD1启动子序列也较为保守,仅有8处单核苷酸突变和1处不同长度的poly A。  2.通过生物信息学分析,发现两个品种猪在LIPIN1启动子的5’端保守区(约-2100~-1800bp)的序列完全一致,并预测到一�

关 键 词: 猪脂代谢基因 启动子序列 脂肪沉积 基因调控 肉品质 硬脂酰辅酶 去饱和酶 磷脂酸磷酸酶

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