导　　师： 胡英杰

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 第一部分树豆中菧类成分甲醚化产物的体外抗肿瘤活性研究研究目的:通过文献研究,树豆叶中木豆素C等多个二苯乙烯（菧）结构类似物有明显的抗肿瘤作用,文献也报道了许多中草药来源的活性成分对细胞色素P450具有抑制作用,部分天然活性成分经结构修饰后,对细胞色素P450的抑制作用显著增强。因此,本实验对树豆叶中的4个菧类化合物进行了甲醚化结构修饰、甲醚化衍生物的分离纯化和结构鉴定,以及比较反应物和产物对人肿瘤细胞的细胞毒性和细胞色素p450的抑制作用,以期获得新的细胞色素P450抑制剂和抗肿瘤化合物。研究方法:（1）将木豆素C（longistylin C）、树豆酮酸A、cajanotone和木豆素（cajaninstilbene acid）与碘甲烷-碳酸钾反应制备O-甲基产物,产物经柱层析纯化和1H NMR,13C NMR,MS,1H-1H COSY,13C-1H COSY,HMBC,IR等光谱分析方法鉴定化合物结构;（2）将获得的甲醚化衍生物与其反应前的原料同时进行抗肿瘤活性实验研究,测试了相关成分对人乳腺癌MDA-MB-231细胞、人宫颈癌细胞HeLa细胞、人肝癌细胞HepG 2细胞、人结肠癌SW480细胞以及三种人非小细胞肺癌A549、NCI-H1299和NCI-H460等7种细胞系的细胞毒活性;（3）观察所得甲醚化衍生物与其反应前的原料对CYP1B1的影响。研究结果:（1）结构依次鉴定为:2-异戊烯基-3,5-二甲氧基二苯乙烯（1）、树豆酮酸A-O-甲醚（2）、5-O-Methyl cajanotone（3）和3-O-甲基木豆素（4）。其中化合物3是未见文献报道的新化合物;（2）肿瘤细胞增殖抑制实验（CCK-8法）结果显示:木豆素C对MDA-MB-231、HeLa、HepG2、SW480及三种非小细胞肺癌细胞的半数抑制浓度IC50分别为14.4、16.1、19.6、17.4及25.7-29.6μM;木豆素对HeLa和SW480之外的5种肿瘤细胞的IC50为44.9-78.3μM;作为对照的3,4’,5-三甲氧基二苯乙烯（三-O-甲基白藜芦醇）对MDA-MB-231、HeLa、SW480和HepG2细胞的增殖IC50为3.0-14.5μM;（3）树豆中菧类成分及其甲醚化产物对CYP1B1的抑制实验结果显示,木豆素C的IC50>100μM,木豆素C的甲醚化产物1未检测出对CYP1B1有明显的抑制作用,树豆酮酸A的甲醚化产物5对CYP1B1的抑制强度是树豆酮酸A的6倍,半数抑制浓度5.4μM。结论:（1）木豆素C的体外抗肿瘤活性与白藜芦醇接近,但其甲醚化产物未表现出明显活性,说明甲醚化对增强菧类化合物的体外抗肿瘤活性没有显著影响;（2）甲醚化修饰增强了CAA对CYP1B1的抑制作用。第二部分毛喉牛奶菜的化学成分研究研究目的:本实验的研究对象为毛喉牛奶菜Marsdenia lachnostoma Benth,是萝藦科牛奶菜属毛喉牛奶菜。利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、碳-18硅胶（ODS）、制备高效液相色谱法等多种手段从毛喉牛奶菜中分离化合物单体,最后采取多种光谱分析方法结合分析化合物结构,与文献对照,确定化合物结构,为下一步寻找抗肿瘤化合物奠定基础。研究方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、碳-18硅胶（ODS）、制备高效液相色谱法等多种手段从毛喉牛奶菜的乙酸乙酯部位中分离化合物单体,最后采取多种光谱分析方法（紫外光谱,红外光谱,一维和二维核磁共振谱,质谱等）结合分析化合物结构,与文献对照,确定化合物结构。研究结果:从毛喉牛奶菜乙酸乙酯部位中共分离得到化合物单体7个,经多种波谱学分析方法结合鉴定,分别为:正十六烷醇（1）、羽扇豆醇（2）、豆甾醇（3）、白桦脂醇（4）、苯甲酸（5）、牛奶菜醇（6）、异鼠李素-3-O-刺槐二糖苷（7）。结论:本实验首次从毛喉牛奶菜中发现了正十六烷醇、羽扇豆醇、豆甾醇、白桦脂醇、苯甲酸、牛奶菜醇和异鼠李素-3-O-刺槐二糖苷,其结构系通过详细的波谱学综合分析确定。更多还原

关 键 词： 树豆 [5812931]甲醚化 [4089521]细胞色素P450 [5199458]抗肿瘤 毛喉牛奶菜 [3426110]柱色谱 [5473775]化学成分 结构鉴定

分 类 号： [R285;R284]

领　　域： [] []