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基于DKK-1/Sost/Wnt信号通路研究补肾健脾活血方防治骨质疏松的骨保护机制

导  师: 黄宏兴

授予学位: 博士

作  者: ;

机构地区: 广州中医药大学

摘  要: 目的:  1、临床研究选择证型是脾肾阳虚型的老年女性原发性骨质疏松症患者,通过观察患者疼痛情况(VAS评分)以及血清骨代谢标志物β-Ⅰ型胶原羧基端肽(β-CTx)、N-端骨钙素(N-MID)和总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(T-PINP)、DKK-1和Sost的含量变化,来观察补肾健脾活血方治疗骨质疏松症的临床疗效。  2、基础实验采用补肾健脾活血方干预过由表达DKK-1,Sost腺病毒转染的成骨细胞,通过观察细胞的活性,钙离子的浓度,ALP活性,及BMP2、CTGF、FGF的表达,研究补肾健脾活血方治疗骨质疏松的分子生物学机制。  方法:  1.临床研究  ①临床研究选择广州中医药大学附属骨伤科医院接收的原发性骨质疏松症老年女性患者40例,将患者分成对照组和治疗组,对照组给予口服钙尔奇D及骨化三醇胶丸;治疗组在与对照组相同给药的基础上,加服汤剂补肾健脾活血方。  ②所选取的研究对象在给药的前一天早晨及治疗结束后的第二天早晨,空腹采集静脉血,取出血清,用酶联免疫分析法评价其标志物N-MID、β-CTx和T-PINP、DKK-1和Sost水平变化;观察用药前、后疼痛视觉模拟评分(VAS评分)。  2、基础实验研究  将培养细胞分成NC对照组,Ad-DKK-1组,Ad-Sost组,Ad-DKK-1+Ad-Sost组。NC对照组用空载腺病毒转染;Ad-DKK-1组由包装过表达DKK-1腺病毒转染;Ad-Sost组由包装过表达Sost腺病毒转染;Ad-DKK-1+Ad-Sost组由包装过表达DKK-1腺病毒和包装过表达Sost共转染。每组分别用含药血清和空白血清干预,采用CKK-8检测细胞增殖,ALP活性检测试剂盒检测ALP活性,流式检测细胞钙离子浓度,蛋白印记检测BMP2、CTGF、FGF的表达。  成果:  1.临床研究  ①对照组和实验组的一般资料资料(包括年龄、体重、身高、BMI和骨密度)都以均数±标准差来描述,先用正态性检验分析数据,�

关 键 词: 骨质疏松症 补肾健脾活血方 信号通路 骨代谢 调控机制 临床疗效

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