导　　师： 叶卓明

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：2型糖尿病的发病率逐年上升且有年轻化的趋势，α-葡萄糖苷酶抑制剂与2型糖尿病的治疗息息相关，如何有效防治慢性病的发生发展成为公共卫生领域研究的一个热点。环境中一些含酚类化合物在慢性病的防治中可能具有应用价值。邻苯三酚和单宁酸是环境中广泛存在的多酚类有机化合物：邻苯三酚可抑制乳腺导管癌原位扩散和癌细胞增值、抗感染、诱导肺癌细胞凋亡等;单宁酸具有抗氧化、抗神经炎症、缓解阿尔茨海默症、延缓糖尿病肾病等作用。据以往报道证实，它们可抑制多种酶活性，但对α-葡萄糖苷酶（α-GC）的活性抑制机制尚且不明。此外，其工业生产废水也会对环境造成一定污染，因此，有效利用含酚废水显得十分重要。本实验采用酶抑制动力学与计算机模拟相结合的方法探讨邻苯三酚和单宁酸分别对α-GC活性抑制及其结构功能的影响，有助于帮助人们了解酚类物质对α-GC的活性抑制机制，为2型糖尿病开发新的药物研究提供一些新的理论方向和依据。　　方法：本实验方法主要有：(1)分别测量不同浓度的邻苯三酚和单宁酸对α-GC的活性影响;(2)评估邻苯三酚和单宁酸是否可逆性抑制α-GC以及抑制类型;(3)不同的作用时间下测定不同浓度的邻苯三酚和单宁酸对酶的活性影响;(4)采用内源荧光法和ANS结合荧光分析该酶的构象及其表面疏水性的变化;(5)利用分子动力学和计算机模拟对接法来预测该酶三维立体结构以及邻苯三酚和单宁酸分别和α-GC相结合的位点及其相关残基。　　结果：邻苯三酚以一种可逆的且相对紧密的方式与α-GC结合，呈典型的混合型抑制，评估其IC50=0.72±0.051mM，Ki=0.37±0.018mM，其介导的酶失活没有显著的时间动力学过程。内源荧光及ANS结合荧光分析表明邻苯三酚能诱导α-GC的三级结构变化，与酶活性丧�

关 键 词： 型糖尿病 邻苯三酚 单宁酸 葡萄糖苷酶 抑制机制

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