导　　师： 凌冰

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 苦瓜素（momordicins）是一类结构相似的葫芦烷型四环三萜类化合物，是源自于苦瓜（Momordica charantia L.）茎叶提取物中的重要抗虫次生代谢物。苦瓜素I和苦瓜素II是苦瓜叶片提取物中含量较多的一类化合物，苦瓜苷B是从苦瓜茎叶提取物中分离得到的新化合物。本文旨在细胞及蛋白组学水平上明确苦瓜素类化合物的抗虫作用机理，为筛选新型作用机制的生物农药提供科学依据。本研究以离体亚洲玉米螟Ostrinina furnacalis幼虫血细胞（Ofh）和粉纹夜蛾Trichoplusia ni卵巢细胞（Hi-5）为对象，在细胞水平系统地研究了苦瓜素I和苦瓜苷B对Ofh细胞的毒力，并研究了苦瓜素I对Hi-5细胞蛋白表达的影响。　　1.苦瓜素Ⅰ和II及苦瓜苷B对Ofh细胞毒理　　用CCK-8法比较了苦瓜素Ⅰ、苦瓜素Ⅱ、苦瓜苷B和印楝素A对Ofh细胞的增殖抑制作用;用倒置相差显微镜和荧光倒置显微镜观察了苦瓜素Ⅰ及苦瓜苷B对Ofh细胞形态结构的影响，并用台盼蓝染色法和流式细胞术研究了其对Ofh细胞的致坏死作用。旨在确定苦瓜素Ⅰ和新化合物苦瓜苷B对Ofh细胞的毒力作用，并探讨其作用机理。研究结果表明，苦瓜素Ⅰ、苦瓜素Ⅱ和苦瓜苷B对Ofh细胞有明显的增殖抑制作用，36 h后的IC50值分别为7.566、24.340及8.514μg/mL，苦瓜素Ⅰ及苦瓜苷B对Ofh细胞的增殖抑制作用明显强于苦瓜素Ⅱ及对照药物印楝素A。苦瓜素Ⅰ和苦瓜苷B处理后的Ofh细胞表现为体积膨大、表面变得粗糙并有明显的空泡现象，严重破坏了Ofh细胞的形态结构。进一步的研究结果表明，8μg/mL的苦瓜素Ⅰ及苦瓜苷B处理Ofh细胞12~48 h，细胞死亡率均高于对照组，呈一定的时间依赖关系。而且苦瓜素Ⅰ对Ofh细胞的急性毒力高于苦瓜苷B。Ofh细胞经AO/EB染色后，用荧光显微观察发现，苦瓜素Ⅰ和苦瓜苷B处理组细胞膜破裂，细胞核受损严重�

关 键 词： 苦瓜素 玉米螟 粉纹夜蛾 茎叶提取物 抗虫作用 生物农药 细胞毒力

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