导　　师： 林晨

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 暨南大学

摘　　要： 目的:　　根据Th17细胞在自身免疫性疾病发展中所起的作用和金黄葡萄球菌肠毒素A对T细胞作用的相关研究,研究金黄葡萄球菌肠毒素超抗原SEA诱导外周血Th17细胞分化的机制,为RA等自身免疫性疾病发病机制的研究提供实验依据.　　方法:　　1.酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞因子IL-17A、IL-1β、TGF-β1、IL-6、IL-23和IL-21的分泌水平.　　2.实时荧光定量PCR(real time-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中STAT3和RORγt mRNA的表达水平.　　3.免疫印迹(Western blotting)检测外周血单个核细胞(PBMC)中STAT3和RORγt蛋白的表达水平.　　4.流式(flow cytometry,FCM)分析外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞分化的百分比.　　结果:　　1.用不同浓度SEA(0、5、10、50、100、500ng/ml)作用于正常人PBMC,细胞因子IL-17A、IL-1β和IL-23的分泌随SEA的浓度增加而增多(P<0.05);而IL-6和TGF-β1的分泌与SEA没有明显的量效关系(P>0.05),IL-21分泌量低于检测灵敏度.　　2.用500ng/ml SEA刺激不同时间(0、6、12、24、48、72h),PBMC分泌的细胞因子IL-17A、IL-1β、和IL-23随时间增加而分泌增多(P<0.05);在SEA作用的初期IL-6分泌增加、然后分泌有所减少,但仍维持在较高水平;TGF-β1与SEA没有时效关系(P>0.05).　　3.SEA组、Anti-CD3/CD28组和LPS组细胞因子L-17A、IL-1β和IL-23的分泌与正常组有明显差异(P<0.05),三组之间IL-17A、IL-1β和IL-23的表达都有差异(P<0.05);SEA组和Anti-CD3/CD28组IL-17A、IL-1β和IL-23的分泌水平较LPS组高(P<0.05);SEA组TGF-β1的分泌比LPS组增多(P<0.05),但其他组之间TGF-β1的分泌没有差异(P>0.05).各组之间IL-6的分泌水平没有差异(P>0.05).　　4.SEA组、Anti-CD3/CD28组和LPS组STAT3mRNA和RORγt mRNA与正常对照组比较表达增加(P<0.05).SEA组、Anti-CD3/CD28组中STAT3mRNA和RORγt mRNA表达比LPS组增加(P<0.05).　　5.SEA组、Anti-CD3/CD28组和LPS组的STAT3和RO Rγt�

关 键 词： 自身免疫性疾病 发病机制 金黄色葡萄球菌肠毒素 辅助性 细胞 细胞分化

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