导　　师： 喻珊珊

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：　　肺动脉高压（PAH）是一种恶性高致死性疾病。肺血管重构是PAH持续发展且难以逆转的病理基础，其中肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的异常增殖是肺血管重构的主要原因之一。因此，通过抑制PASMCs的异常增殖进而逆转肺血管重构，在PAH的治疗中显得尤为重要。此外，PAH患者受损细胞中具有类似于肿瘤细胞的糖酵解作用，糖酵解与细胞的快速增殖密切相关，从能量代谢的角度来研究PAH的发病机制将有望为PAH的治疗另辟蹊径。　　吴茱萸次碱（Rut）具有舒张血管、抑制血管生成、抗氧化应激、调控细胞增殖凋亡等功能，在心血管疾病中具有广泛的应用。然而它与低氧性肺动脉高压（HPH）的关系目前鲜有报道。本课题以人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)为研究对象，建立HPH体外模型，研究Rut对低氧诱导的HPASMCs的作用及相关机制。　　方法：　　1、Rut在HPASMCs中IC50的测定　　常氧下用CCK-8法测定Rut在HPASMCs中的IC50，并探索其最佳给药浓度。　　2、体外HPH低氧模型的构建　　构建HPASMCs体外低氧模型，用CCK-8和细胞计数法测低氧下HPASMCs的增殖率，流式细胞术测凋亡率。　　3、Rut在低氧诱导的HPASMCs中的功能研究　　将Rut按0、0.5、5、50μmol·L-1剂量在低氧下对HPASMCs进行分组干预后，按上述方法测细胞的增殖率、凋亡率、上清乳酸含量。用qRT-PCR测HIF-1α的mRNA表达，用Western-Blot测HIF-1α及下游靶基因p53、p21、GLUT-1、PCNA、VEGF、EPO的蛋白表达。　　4、Rut在低氧诱导的HPASMCs中的作用机制研究　　用siRNA对HIF-1α进行干预后，用5μmol·L-1的Rut对细胞进行给药处理。按上述方法测低氧下HPASMCs的增殖率、凋亡率、上清乳酸含量;HIF-1α及下游靶基因p53、p21、GLUT-1、PCNA的蛋白表达。　　5、GLUT-1在低氧诱导的HPASMCs中的作用研究　　用siRNA对GLUT-1进行干预后，用CCK-8和�

关 键 词： 肺动脉高压 吴茱萸次碱 肺血管重构 平滑肌细胞 细胞凋亡 药理活性

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