导　　师： 郑易之;刘国宝

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 深圳大学

摘　　要： 低温是阻碍植物生长、影响作物产量和限制植物地理分布的主要非生物因素之一。经过长期的进化,很多植物已产生了适应低温环境的生理机制。许多研究表明,胚胎晚期富集（LEA）蛋白的表达与植物的耐寒性有着密切的联系。根据LEA蛋白的保守序列特性,可将LEA蛋白分为6~7组。大豆PM1蛋白属于第4组LEA蛋白,已有研究表明PM1蛋白在干旱条件下具有稳定细胞膜的作用,但其发挥作用的机制仍不清楚。本实验制备了POPC脂质体和含有20%EPG的POPC:EPG脂质体。通过浊度法、动态光散射法、显微镜法研究了经液氮和-20℃两种冻融条件处理后上述两种脂质体的改变,以及大豆PM1蛋白、PM1-N蛋白对两种脂质体的保护作用。结果发现,经过两种冻融条件处理的POPC脂质体和POPC:EPG脂质体,浊度都分别由0.3和0.2升高至0.8;部分脂质体的粒径由140nm变大到800nm;在显微镜下可观察到脂质体溶液出现大片聚集物。在脂质体溶液中加入PM1和PM1-N蛋白（0.8mg/m L）后,两种脂质体的浊度变化不显著;绝大部分脂质体的粒径维持在120nm~160nm范围间;显微镜下观察两种脂质体溶液均为均质状,无大片聚集物出现。上述结果表明PM1和PM1-N蛋白可以维持脂质体的稳定性,防止脂质体的聚集融合。本文利用MC-540测定脂质体磷脂分子的流动性。POPC脂质体经过液氮和-20℃处理后,MC-540的荧光值分别由8500和9300降低至6000,PM1和PM1-N蛋白能减缓MC-540的荧光强度的降低程度。POPC:EPG脂质体经液氮冻融处理后,MC-540荧光值从1600升高至2600;经过-20℃冻融处理后,MC-540荧光值由1600升高到2200。加入PM1和PM1-N蛋白,脂质体溶液的荧光值与冻融处理前水平相近。表明在两种冻融条件下,PM1和PM1-N蛋白能维持两种脂质体的流动性。本文利用DSC测定PM1及其短肽对脂质体相变温度的影响,POPC脂质体和POPC:EPG脂质体的相变温度分别为1.3℃和1

关 键 词： 胚胎晚期富集蛋白 大豆 蛋白 短肽 生物膜 脂质体 冷冻保护

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