导　　师： 段传志

授予学位： 博士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 目的：神经炎症和神经元凋亡是动脉瘤性蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage，SAH)后继发性脑损伤的重要因素，探索有效的抗炎症和抗凋亡方案是必要的。本研究拟通过检测大鼠蛛网膜下腔出血后锌指蛋白36(Tristetraprolin，TTP)及其上游磷酸化蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase2A，PP2A)的表达，评估早期脑损伤(Early brain injury，EBI)后PP2A/TTP抗炎症反应和抗神经细胞凋亡的生物活性及其作用机制，为蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的药物研发提供更好的思路，为临床应用提供理论依据。　　方法：本研究建立大鼠SAH血管内穿刺模型。应用免疫印迹法(Western blot)检测PP2A和TTP在SAH后6小时，12小时，24小时，48小时和72小时的蛋白表达情况;根据干预因素不同，分为Sham、SAH+Vehicle(normal saline，NS)、SAH+ScrsiRNA、SAH+PP2A siRNA、SAH+TTP siRNA、SAH+FTY720、SAH+FTY720+TTP siRNA。应用免疫荧光进行细胞定位;通过建模前24小时左侧侧脑室分别注射PP2A激动剂FTY720、PP2A siRNA、TTP siRNA干预大鼠，评估各实验组24小时点大鼠SAH后脑损伤的情况：采用神经行为学检测（改良Garcia评分）评估SAH大鼠的神经行为学，干湿重法检测大脑组织含水量评估脑水肿情况，经PP2A激动剂FTY720，PP2A siRNA，TTP siRNA干预后，应用Western blot法分别检测PP2A、TTP及其下游炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-8）和凋亡相关因子（Bcl-2、Caspase-3）的表达水平改变，应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal deoxynucleotidyltransferasedUTP nick-end labeling,TUNEL)染色检测神经细胞凋亡情况。　　结果：本组研究发现SAH后72小时内，PP2A和TTP的表达在24小时时相点达到高峰，尤以TTP表达的水平较为突出，PP2A表达趋势相对较平稳。PP2A和TTP分别神经元核抗原(Neuron specific nuclear protein，NeuN)共荧光定位，说明其在神经元细胞内表达。Western blo

关 键 词： 动脉瘤性蛛网膜下腔出血 继发性脑损伤 发病机制 磷酸酶 锌指蛋白 抗炎症反应 神经保护作用