导　　师： 徐汉虹

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 糖基导向农药通过将糖与农药分子偶联，借助植物体内的转运蛋白使农药分子向植物特定部位输导与积累。本文以两个糖基氟虫腈分子（GOTF和GOF）为研究对象，以蓖麻为模式植物，进行了糖基氟虫腈吸收转运与降解研究;以β-葡萄糖苷酶（EC.3.2.1.21）为靶标，进行了糖基氟虫腈的酶代动力学和分子对接研究，探索了其作用方式及水解差异。　　通过蓖麻幼苗体系研究了GOTF和GOF的韧皮部输导性。结果显示，5 h内韧皮部液中能检测出糖基氟虫腈，GOF的输导性优于GOTF。但在植物体内GOF的水解率比GOTF要低，推测其输导性差异有可能是由于降解差异所导致。　　以β-葡萄糖苷酶底物4-硝基苯基-β-D-葡萄糖苷（pNPG）为对照，通过体外酶解实验研究GOTF、GOF和pNPG降解差异。结果显示：与pNPG相比，糖基氟虫腈的水解率较低，其顺序为 pNPG＞GOTF＞GOF。这一体外降解结果与体内的降解相一致。　　采用双倒数作图法测定了糖基氟虫腈和pNPG酶代动力学参数，探索了糖基氟虫腈和pNPG降解差异的原因。结果显示：糖基氟虫腈的Km值小于pNPG，但pNPG的转换常数远远大于糖基氟虫腈。这一结果表明糖基氟虫腈与pNPG的水解率差异主要由于与β-葡萄糖苷酶解离过程所导致。　　通过不同浓度的GOTF对 pNPG抑制实验研究糖基氟虫腈类化合物与β-葡萄糖苷酶相互作用。双倒数作图发现，三条直线交于y轴，因此GOTF对pNPG的抑制类型为竞争性抑制，即说明糖基氟虫腈有可能与β-葡萄糖苷酶底物pNPG位于同一个β-葡萄糖苷酶活性中心。　　通过同源建模和分子对接进一步研究糖基氟虫腈与β-葡萄糖苷酶作用机制及差异。结果显示，GOTF与酶的结合能为-10.5 kcal/mol，其次为GOF（-8.7 kcal/mol），最小为pNPG（-8.4 kcal/mol）。与pNPG相比，糖基氟虫腈中苷元的疏水作用在底物与酶的结合中�

关 键 词： 糖基氟虫腈 葡萄糖苷酶 作用方式 水解差异 蓖麻幼苗

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