导 师: 李海云
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 华南农业大学
摘 要: 福寿螺原产于南美洲亚马逊河流域,目前已侵入我国在内的许多亚洲国家。2000年世界自然保护联盟将其列为恶性外来物种之一。福寿螺不仅危害农作物等水生作物,而且还传播广州管圆线虫病等。本文首次利用RACE技术克隆到福寿螺雌激素受体cDNA全长,并且探究E R在福寿螺的组织分布、卵巢发育不同阶段的表达量以及在不同外源激素作用下精巢、卵巢中ER的表达量。主要结果如下: (1)ER的分子特征 根据亲缘关系较近物种的ER的保守区域设计引物,通过克隆测序拼接后获得cDNA全长序列,共1636bp,包括5′UTR128bp,3′UTR101bp。开放阅读框长1407bp,编码468个氨基酸,其中编码区GC含量为50.68%,等电点为7.40,分子量为51.1KD,亲水性氨基酸含量为67.32%,没有检测到信号肽序列和跨膜肽段结构。 (2)ER的组织分布 通过实时荧光定量PCR方法研究福寿螺ER的组织分布。结果显示:ER在福寿螺精巢、卵巢、头、肝脏、足、触角、胃、鳃、肌肉和蛋白腺中都有表达,并且在头、肝脏、精巢、卵巢和蛋白腺等这些生殖轴组织中的表达量相对较高。 (3)ER在卵巢发育过程中的表达 通过实时荧光定量PCR研究在卵巢发育过程中ER的表达情况,检测到在福寿螺卵巢发育的各个阶段都存在特异性表达。在卵巢发育过程中,ER的表达呈先上升后下降趋势,在成熟期时到达最高值,休止期时到达最低值,其中,成熟期时的ER的表达量与其他时期的表达量之间都存在显著差异,排放期和增殖期、休止期之间亦存在显著差异。 (4)外源激素处理下ER的表达 通过实时荧光定量PCR研究在外源激素作用下ER的表达情况,从整体来看,高浓度雌二醇可以促进ER的表达,并且在作用第三天表达量达到最高;不同浓度的他莫昔酚都可以抑制ER的表达,并�