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紫芝菌丝体多糖的分离纯化、结构鉴定及生物活性研究

导  师: 吴晖

授予学位: 硕士

作  者: ;

机构地区: 华南理工大学

摘  要: 灵芝作为传统的名贵药材,其生物活性功能已被相关领域普遍认可,特别是灵芝多糖更是广大研究者的研究重点。本文以紫芝菌丝体为原料,对紫芝菌丝体多糖的分离纯化、理化性质、结构鉴定、免疫调节和抗溶血特性进行了系统的研究,得到以下结果:利用L9(34)正交实验确定了紫芝菌丝多糖提取的最佳实验条件为:浸提时间4 h,温度90℃,料液比1:30,pH值7.0,按此条件浸提1次,紫芝菌丝体多糖的得率为9.56%。将经过3次Sevage脱蛋白处理的紫芝粗多糖LZ经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephacryl S-200 HR凝胶柱结合分离纯化,得到LZa-1、LZb-1和LZc-1三种单一多糖组分,分子量分别为7498 Da,22827 Da,95614 Da。多糖组分LZa-1、LZb-1,LZc-1与特征试剂反应、紫外全波段扫描和刚果红实验,结果显示,这三种多糖均不含淀粉、蛋白质、酚类和核酸等物质,且不具有三螺旋结构。扫描电镜结果表明,LZa-1呈珊瑚状结构,表面光滑,伴有突起小泡,末端无凸起、光滑;LZb-1呈圆盘形结构,表面分布着圆形泡状结构,圆盘状结构有凹陷和空洞;LZc-1呈柏叶状结构,其间清晰可见棒状结构,并伴有凸起的椭圆状小型聚集体,末端为圆形且无分枝。红外光谱分析结果显示,LZa-1、LZb-1、LZc-1都有多糖的特征峰,且亚基均可能是由含酸性单糖残基组成的聚合体。LZa-1中存在α-吡喃糖苷,LZb-1中存在吡喃型糖环和甘露糖,LZc-1中存在α-吡喃糖苷、β-吡喃糖苷和有甘露糖。GC-MS测定结果表明三种多糖均由鼠李糖-岩藻糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖组成,对应的摩尔比依次为0.94:0.50:1.68:26.91:4.80:17.12、1.05:1.56:20.66:1.97:5.77:12.16和1.53:0.61:4.02:5.16:4.25:23.28。高碘酸氧化和Smith降解结果表明,LZa-1主要由1→2、1→3、1→4和1→6糖苷键连接而成,LZb-1主要由1→2或1→6、1→3糖苷键连接而成,LZc-1主要由1→4、1→2或1→6、1→3糖苷键连接而�

关 键 词: 紫芝多糖 分离纯化 结构鉴定 免疫调节 抗溶血

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