导　　师： 姜子德

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 由荔枝霜疫霉（Peronophythora litchii Chen ex Ko et al.）引起的霜疫病是我国荔枝生产过程中为害最严重的病害。该病原菌隶属卵菌，为二倍体生物且在遗传进化上与真菌的亲缘关系甚远，致使用于防治真菌病害的广谱性杀菌剂对其防治效果不佳，且先前的基因敲除技术不适于研究其功能基因。本研究基于聚乙二醇（Polyethylene glycol，PEG）介导的原生质体转化技术与外源双链 RNA（double-stranded RNA， dsRNA）介导的转录后基因沉默策略对荔枝霜疫霉M90与MAPK10两个基因在病原菌生活史和致病性方面的作用与功能进行了研究，主要结果如下：　　1.通过对荔枝霜疫霉全基因组进行分析，筛选到一个与致病疫霉（Phytophthora infestans） RNA结合蛋白M90相似度达73%的同源蛋白，将其命名为Peronophythora litchii M90（PlM90）。对荔枝霜疫霉M90蛋白与致病疫霉、大豆疫霉（Phytophthora sojae）、拟南芥霜霉（ Hyaloperonospora arabidopsidis）、向日葵霜霉（ Plasmopara halstedii）、烟草霜霉（ Peronospora tabacina）等卵菌及酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）等模式生物的该同源蛋白进行序列比对与系统发育分析，结果表明 M90同源蛋白普遍存在于真核生物中，且在卵菌中高度保守，尤其是其RNA结合结构域。　　2.采用实时荧光定量 RT-PCR技术对荔枝霜疫霉 M90基因在不同生长发育时期与侵染阶段的转录水平进行了研究，结果显示M90基因在孢子囊、游动孢子、休止孢阶段的转录水平是菌丝阶段的2~3倍，在卵孢子阶段的转录水平是菌丝阶段的24倍，在休止孢萌发与侵染阶段的转录水平均明显低于菌丝阶段，表明M90基因可能参与调控荔枝霜疫霉有性生殖与无性生殖过程，而在侵染过程中的作用相对较弱。　　3.构建pHAM34::PlM90基因沉默载体并通过PEG介导的原生质体转化、基

关 键 词： 荔枝霜疫霉菌 基因沉默 原生质体转化 生长发育 致病性

领　　域： []