导　　师： 吴文如

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 目的：　　中药分子鉴定是在传统鉴定方法上，基于分子生物学技术开发出来的一种新型鉴定方法，可通过直接分析遗传物质的多态性来推断物种内在的遗传变异从而实现药材鉴定。该方法从基因水平上提供一种鉴别依据，不受外界因素、生物发育阶段或器官组织差异的影响，可以抛开形态相似的假象，还能避免化学特征的过于多变，因此具有鉴别位点多，结果可靠，分辨率高等优点。中药分子鉴定不仅易找到种级的鉴定特征，甚至可以进行种下等级的鉴定。　　快速、简便、现场化一直是中药分子鉴别的追求。然而，目前的分子鉴定方法操作过程较为复杂繁琐，耗费时间较长，需要多种大型贵重仪器，无法实现现场快速鉴别。为实现中药现场快速鉴别，黄璐琦科研团队提出了一种利用碱裂解DNA提取法、快速PCR扩增法等进行分子鉴定的中药现场快速分子鉴别体系，并对金银花等中药进行了应用，但仍存在DNA提取时间长、检测过程繁琐等问题。　　名贵中药是品种问题混乱的高发区。铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）属兰科石斛属，俗称铁皮兰、黑节草，是我国传统名贵中药。由于石斛属植物种间、种内形态相似、分布范围广泛、杂交品种众多，市场上常出现质量参差不齐的石斛类药材及其混伪品，导致其用药质量和安全难以保证。使用传统鉴定方法难以达到高效的石斛类药材的真伪鉴别目的，因此急需建立快速准确的铁皮石斛专属分子鉴别方法。虽然有研究使用AFLP、RAPD、SSR、多重PCR等技术，从分子水平上鉴别铁皮石斛及其伪品，但这些分子鉴别方法均包含DNA提取、核酸扩增、电泳检测等过程，操作复杂，不仅需要大量贵重仪器，且鉴别时间较长，只能在实验室中由专业人员操作检测，均未能实现快速鉴别的目的。　

关 键 词： 铁皮石斛 分子鉴定 滤纸法 环介导等温扩增 现场检测