导　　师： 杜宝新

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 广州中医药大学

摘　　要： 目的:肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种侵犯上下运动神经元的神经系统变性疾病,临床表现为肌无力、肌萎缩及锥体束征等不同组合,起病后多数患者仅存活3年,最终多死于呼吸衰竭,其发病机制至今尚未阐明。前期基础研究发现健脾益肺方可能通过抑制小胶质细胞活化发挥抗神经炎症的作用,从而延缓疾病进展。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38-Mitogen-Activated Protein Kinase,p38MAPK)是MAPK家族主要成员之一,参与神经炎症反应,p38MAPK通路介导胶质细胞活化,在突变型SOD1转基因小鼠模型中发现,活性小胶质细胞和星形胶质细胞所致的神经炎症使运动神经元死亡。为探讨神经炎症及神经细胞凋亡在肌萎缩侧索硬化发病机制中的作用,本研究通过检测不同浓度健脾益肺方对hSOD1-G93A转基因小鼠体重的变化,发病时间和生存期及运动功能的影响;用免疫荧光(immunofluorescence,IF)和蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测ALS小鼠脊髓磷酸化p38MAPK蛋白及炎症因子的表达;原位末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-media-ted d UTP end-labeling,TUNEL)检测ALS小鼠脊髓神经细胞凋亡情况。从抗炎症及抗细胞凋亡保护神经元的角度解释健脾益肺对ALS小鼠的作用机制,为健脾益肺方治疗ALS提供更多实验依据。方法:1.实验动物hSOD1-G93A转基因小鼠,8周龄,共24只,按随机数字表分成4组,每组6只,即模型组、健脾益肺方低浓度组(2.86g·kg)、健脾益肺方中浓度组(5.72g·kg)、健脾益肺方高浓度组(11.44g·kg),同窝出生的普通野生型小鼠,8周龄,共6只,为正常对照组。模型组与正常组小鼠分别给予生理盐水,药物组予不同浓度的中药,每日灌胃1次。2.健脾益肺方对hSOD1-G93A转基因小鼠行为学的影响每周测定小鼠体重并记录;用weydt评分法来评估ALS小鼠的发病时间和生存期,用悬尾试验、牵引试验、疲劳转棒试验�

关 键 词： 健脾益肺方 肌萎缩侧索硬化 转基因小鼠 胶质细胞 炎症因子 通路

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