导　　师： 孙素霞

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 结直肠癌是最常见的肿瘤之一，它存在着发病率高、治愈率低、复发率高、预后差的特点，对全球造成了巨大的疾病负担，严重阻碍了经济发展。近年来，尽管手术和放化疗的联合应用，结直肠癌病人的五年生存率有所提高，但放化疗的严重副作用是难以避免的。因此，亟待寻求一种相对安全、高效的药物来防治结直肠癌。　　丁酸是膳食纤维在肠道内发酵的一种产物，主要作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor，HDACi)，抑制组蛋白去乙酰化酶的活性，从而导致组蛋白高度乙酰化，从而发挥抗结直肠癌的作用。研究发现，较低浓度（2mmol/L）的丁酸钠（sodium butyrate，NaB）可诱导结直肠癌细胞自噬，而抑制自噬可增强结直肠癌细胞凋亡;较高浓度(10mmol/L)的NaB可通过钙池调控钙内流途径促发内质网和胞质中钙稳态失衡，即下调内质网Ca2+([Ca2+]ER)浓度、升高胞质Ca2+([Ca2+]1)浓度，进而诱导结直肠癌细胞凋亡。那么，NaB促发的Ca2+稳态失衡与细胞自噬之间是否存在关联？CaMKKβ-AMPK通路是自噬的经典信号通路，且CaMKKβ的活性与细胞内Ca2+浓度密切相关，同时也是AMPK的上游信号分子。那么，NaB能否通过引发Ca2+稳态失衡，进而激活CaMKKβ-AMPK信号通路，从而发挥其抗结直肠癌的作用？　　目的：　　探讨NaB诱导结直肠癌细胞自噬的分子机制，为防治结直肠癌提供理论依据。　　方法：　　用不同浓度NaB处理结直肠癌细胞，免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测LC3、CaMKKβ、AMPKα和ACC分子表达情况;透射电镜观察自噬体的形成。免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测BAPTA-AM（细胞内Ca2+螯合剂）、STO-609（CaMKKβ抑制剂）、Compound C（AMPK抑制剂，简写Com.C）和RNAi技术（下调CaMKKβ和AMPKα表达）等预处理对NaB诱导的结直肠癌细胞自噬及p-CaMKKβ、p-AMPKα和

关 键 词： 结直肠癌 丁酸钠 细胞自噬 钙调素依赖蛋白激酶 腺苷酸活化蛋白激酶 实验药理