导　　师： 吴芃

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 南方医科大学

摘　　要： 背景长期滥用毒品氯胺酮（ketamine）会引发膀胱间质炎症（ketamine-induced cystitis,KC）,主要临床表现为尿频、尿急、尿痛、排尿困难及急迫性尿失禁等。膀胱纤维化是中晚期KC患者的严重并发症。膀胱壁由于纤维结缔组织积聚而发生重塑,引起膀胱纤维化、挛缩,使其变为小容量、高压力的低顺应性膀胱,导致膀胱贮尿和排尿功能障碍,进一步发展会导致上尿路积水和肾功能损害,危及生命。目前少有研究涉及ketamine引发膀胱纤维化的机制。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transitions,EMT）是指上皮细胞失去极性、在形态学上向间质细胞转变的生物学过程。目前已证实EMT广泛参与肾脏、肝脏、肠壁及肺脏的纤维化,并已成为有效终止、逆转脏器纤维化的重要靶点,然而其在膀胱纤维化中的作用尚未见报道。本项目拟从EMT介导器官纤维化入手,结合体内外模型,通过分子机制研究阐明TGF-β1信号通路介导的EMT在KC纤维化发生发展中的机制。方法1.建立KC大鼠模型并探讨EMT与膀胱纤维化的关系雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠18只,体重180-200g,随机分为3组,每组6只,分别为对照组（Control）,ketamine低剂量组（LK,30mg/kg）,ketamine高剂量组（HK,60mg/kg）。每日腹腔注射ketamine溶液或生理盐水,持续16周。采用代谢笼记录24h饮水量和尿量。采用排尿印迹法评估尿频情况。对大鼠行尿动力检查,记录排尿收缩次数、逼尿肌不稳定收缩次数、膀胱内压力（基线值,阈值,最大值）、排尿量、膀胱最大容量,计算膀胱顺应性。处死大鼠后取膀胱组织,制作石蜡切片,HE及Masson染色评估膀胱上皮损害及间质纤维化情况,免疫组化实验评估 E-cadherin、Collageon I、Vimentin、Fibronectin 表达情况,E-cadherin-FSPl免疫荧光共定位评估膀胱上皮EMT发生情况。2.在KC大鼠模型中,明确TGF-β1特异性阻断剂SB505124对EMT及膀胱纤�

关 键 词： 氯胺酮 膀胱炎 纤维化 上皮间质转化 转化生长因子

领　　域： []