导　　师： 朱良;杨天龙

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南理工大学

摘　　要： 胶原蛋白中蕴藏着多种生物活性肽,它们天然无毒副作用,生物活性肽的开发能为传统食品行业的发展提供广阔的前景。本文在单因素实验的基础上正交优化得到尼罗罗非鱼鱼皮胶原蛋白提取的最佳实验条件为:温度40℃,料液比1:15,提取时间14 h,在此条件下,得率为71.13%。对其理化性质进行研究,发现罗非鱼皮胶原蛋白中羟脯氨酸含量较高,具有形成凝胶的良好能力,符合胶原蛋白特征。此外,其等电点处于酸性范围内,表现出良好的亲水性、吸油性、乳化性和乳化稳定性,可以较好的用于奶制品、肉制品等各种需要保留油脂的食品中。经实验用酶的筛选、单因素实验和响应面分析确定了制备罗非鱼皮胶原蛋白肽的最佳工艺条件为:复合蛋白酶加酶量3.2%,在pH 8.0、48℃下酶解6 h。将其依次经过超滤膜、DEAE-52 Cellulose离子交换柱层析、Sephadex G-25凝胶过滤和Re-HPLC制备柱分离纯化,最终得到单一峰TP,其黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制活性的IC值为3.51mg/mL。经过氨基酸序列分析得到组分TP的氨基酸序列为Thr-Ser-Pro-Trp。体外细胞实验表明TP在1.00.0 mg/mL对细胞无明显毒性,当TP达到一定浓度时,能够有效降低细胞的尿酸生成量。将TP以不同的剂量灌胃高尿酸血症模型小鼠,对小鼠血清相关指标、肝脏功能指标、肾脏功能指标进行测定,结果表明与高尿酸血症小鼠相比,TP治疗组小鼠血清尿酸、肌酐、尿酸氮水平、GOT、GPT酶活性均显著下降,提高肝肾组织中SOD和CAT的活力并降低MDA含量。说明TP具有降尿酸的作用效果,且对高尿酸血症小鼠的肝肾有一定程度的保护作用。通过检测血清中性激素水平、睾丸组织睾酮含量及氧化损伤指标,肝脏组织中尿酸代谢酶活力,肾脏相关尿酸盐转运体蛋白表达量的变化对其降尿酸作用机制进行研究。实验结果显示,TP能显著降低高尿酸血症小鼠血清雌二醇�

关 键 词： 罗非鱼皮 多肽 高尿酸血症

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