导　　师： 刘琼光

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 细菌性软腐病是指主要由软腐肠杆菌科（Enterobacteriaceae）引起的植物病害，主要包括果胶杆菌属（Pectobacterium）和迪克氏菌属（Dickeya）的病原细菌，由果胶杆菌属（Pectobacterium）引起的软腐病是世界性的重要植物细菌病害，其发生可导致植物组织器官的严重腐烂。Pectobacterium spp.侵染的寄主种类多，分布广泛，曾在许多的农作物和观赏性植物上有相关的报道。　　本论文从广东省广州市和惠东县采集的甘薯和马铃薯软腐病株，以及江西省安福县采集的烟草软腐病株，通过病原细菌的分离纯化、科赫氏法则验证，共获得11个软腐病原细菌菌株，其中甘薯上分离到1个病原细菌菌株Sp-1，马铃薯上分离到Po-2、Po-3、Po-4、Po-10和Po-11等5个病原细菌菌株，烟草上分离到Tb-5、Tb-6、Tb-7、Tb-8和Tb-9等5个病原细菌菌株。通过16S rDNA序列分析，11个菌株初步鉴定为果胶杆菌属（Pectobacterium）。　　生理生化试验结果表明，11个供试菌株在37℃可生长，可利用丙二酸、蔗糖、乳糖和麦芽糖，对红霉素敏感;不利用菊粉、山梨醇和a-甲基葡萄糖苷，但在吲哚的产生、阿拉伯糖和海藻糖发酵、吐温-80利用以及肌苷利用等表现出差异。寄主范围测定结果表明，供试菌株可侵染22个科34种植物。　　选择acnA、gapA、icdA、mdh、mtlD、pgi、proA、rpoS等8个看家基因，分别对11个供试菌株进行单基因和多基因系统发育分析，并通过Pectobacterium果胶酸盐裂解酶基因(pectate-lyase，pelY)特异区域引物Y1/Y2、Pectobacterium atrosepticum特异引物Y45/Y46、Pectobacterium wasabiae特异引物PW7011F/PW7011R、Pectobacterium carotovora subsp.brasiliensis特异引物BR1f/L1r和 Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum特异引物EXPCCF/EXPCCR等5对特异引物进行Pectobacterium种和亚种的PCR检测和验证，结果表明，分离自甘薯上的病原细菌Sp-1鉴定为Pect

关 键 词： 甘薯 烟草 马铃薯 细菌性软腐病 肠杆菌科 分离纯化 病原鉴定

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