导 师: 曹洋
授予学位: 硕士
作 者: ();
机构地区: 广州中医药大学
摘 要: 目的: 课题组前期的实验研究发现,金福安汤不仅下调Lewis小鼠肺癌组织p120ctn的异位表达,还降低A549细胞p120ctn磷酸化程度,而p120ctn又是Kaiso重要的和肺癌转移密切相关的结合蛋白,推测金福安汤可能是通过调控p120ctn及其转录因子Kaiso的表达而干预肺癌转移的。本研究拟通过体外实验观察金福安汤对肺癌各种细胞系的增殖、迁移和侵袭能力的影响,探究p120ctn各亚型、其相关转录因子Kaiso和p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的表达,以探究金福安汤是通过连环蛋白p120ctn的哪些亚型发挥作用,和其如何调控转录因子Kaiso发挥抗肿瘤转移的作用,以及其如何通过影响p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化状态来干预肺癌转移的机制,为揭示中药复方干预肺癌转移机制的研究提供了理论支持和实验依据。 方法: 将人肺腺癌细胞株H1299、H1650和A549细胞以及人肺鳞癌细胞株H520进行细胞培养传代。运用CCK8法观察金福安汤对不同类型肺癌细胞增殖能力的抑制作用。通过体外基质胶迁移和侵袭实验(transwell)检测金福安汤对各种类型肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。运用免疫荧光、Western-Blot方法探讨金福安汤对不同肺癌细胞中p120ctn、p120ctn亚型1A(p120ctn1A)、p120ctn亚型3A(p120ctn3A)和相关转录因子Kaiso的表达以及p120ctn丝氨酸288位点的磷酸化的影响。 结果: 1.金福安汤对人肺腺癌细胞株H1299、H1650和A549细胞以及人肺鳞癌细胞株H520有增殖抑制作用,且不仅具有一定的时间依赖性还具有一定的浓度依赖性(p<0.05),顺铂组也能显著抑制各肺癌细胞的增殖能力,其和空白对照组相比均具有显著的统计学差异(p<0.05)。 2.体外基质胶迁移和侵袭实验中,中药金福安汤低、中、高剂量组可发现不同类型肺癌细胞株中迁移和穿透小室底部的细胞数目均在下降,且迁�