导 师: 兰泽栋
授予学位: 硕士
作 者: ;
机构地区: 广州医科大学
摘 要: 背景: 人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)是具有多向分化潜能的非造血来源多能干细胞。它在特定条件下,可向骨细胞、脂肪细胞及神经元细胞等方向分化。此类细胞易于分离、培养以及扩增。扩增后仍保留分化潜能,并且具有低免疫原性、免疫调节功能、易于转染和稳定表达外源基因等特征。因此,它有望被应用于牙根吸收、牙槽骨丧失等组织修复的治疗中。 MicroRNAs(miRNAs)是一类长约16~25个核苷酸的小分子非编码RNA,它们能够调控特定的靶基因表达。大量研究表明,干细胞的增殖、分化处于miRNAs的调控之中。本课题组前期运用基因芯片及实时荧光定量PCR(quantitative RT-PCR,q-PCR)的实验结果显示miR-10b-3p在骨髓间充质干细胞成骨诱导培养基诱导人骨髓间充质干细胞(humanbone mesenchymal stem cells,hBMSCs)分化过程中表达明显降低,且通过体外及体内实验对miR-10b-3p进行了功能验证,明确了其在hBMSCs向成骨/成牙骨质方向分化过程中的生物学作用。 环形RNA(Circular RNA,circRNA)是一种特殊的非编码RNA分子,与线型RNA不同,它呈封闭环状结构,比线性RNA稳定,不易被核酸外切酶降解。尤其是近年来发现它具有miRNA海绵和调控转录的功能,是分子生物学领域的研究热点。由于circRNA具有重要的生物学功能,猜想它也可能通过与miRNA相互作用,在hBMSCs的骨向分化过程中发挥着调控功能。因而我们认为miR-10b-3p在骨髓间充质干细胞向成骨/成牙骨质方向分化过程中的生物学作用受到特定的circRNA调控,并且希望通过对相关circRNA与miR-10b-3p结合位点的研究,进一步探索hBMSCs的骨向分化过程。 目的: 1.检测hBMSCs成骨前后整体circRNAs的差异性表达情况,并预测差异性表达circRNAs的miRNAs结合位点,为以后研究circRNA