导　　师： 罗满林

授予学位： 硕士

作　　者： (）;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 副流感病毒5型(Parainfluenza Virus5, PIV5)也被称为犬副流感病毒，是犬科、猫科等动物呼吸道疾病的主要病因，给我国养犬业乃至其他养殖业造成了严重的损失。副流感病毒5型是 RNA病毒，属于副黏病毒科，腮腺炎病毒属，全基因总长度为15246bp，包含7段基因，即：NP、V/P、M、F、SH、HN、L。据血清学调查显示，该病毒呈世界性分布，且宿主范围广，犬、鼠、牛、猪等动物感染此病毒均见报道。本文所研究的副流感病毒5型是由广东某动物园提供的小熊猫、东北虎、华南虎分离到的。此前，关于小熊猫感染副流感病毒5型的病例还未见报道，虎源感染此病毒虽有依据，但未进行深入研究，相关序列还未能在NCBI上查到。因此，对分离到的小熊猫源和虎源副流感病毒5型进行全基因扩增意义重大，可以此了解它们的遗传进化规律，为副流感病毒5型的预防、治疗及后续相关疫苗的研究提供依据。　　本研究于2014~2016年，收集疑似副流感病毒5型（PIV5）感染病例样品14份（小熊猫4份，非洲狮4份，东北虎1份，华南虎1份，环尾狐猴4份）经研磨、离心、过滤等处理，接种Vero细胞，进行病毒的分离培养，并观察细胞病变。收获病毒并对此进行副流感病毒5型的鉴定。本试验成功分离出3株副流感病毒5型，分别命名为ZJQ-221（小熊猫）、PIV5-SR（东北虎）、PIV5-SC（华南虎），阳性率为21.4%（因动物园采样不便，样品数量有限）。三种病毒液接种到Vero细胞上，传至第三代后能使Vero细胞出现空泡，拉网的现象。通过透射电镜观察到，病毒液中有呈圆形，含囊膜，直径在50~200nm的病毒颗粒。　　设计12对特异性引物，对小熊猫和东北虎分离株全基因作分段扩增，均获得预期目的大小条带。测序、剪切、拼接获得两条完整的全基因序列。分析比对序列时发现，两株病

关 键 词： 副流感病毒 型 序列分析 遗传进化 致病性

领　　域： []