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木糖氧化无色杆菌噬菌体生物学特性及基因组学研究

导  师: 蒋爱民;袁静

授予学位: 博士

作  者: ();

机构地区: 华南农业大学

摘  要: 木糖氧化无色杆菌为革兰阴性杆菌,多分布于水生环境,也见于各种临床标本。随着抗生素大量和长期的使用,木糖氧化无色杆菌对多类抗生素都产生了耐药性,防控变得更加困难,因此开发新的木糖氧化无色杆菌防控方法是刻不容缓的。噬菌体是感染细菌的病毒,能专一高效地裂解宿主菌,具有增殖快、无残留和安全有效等特点,可以作为抗生素的替代品,研发前景广阔,研究思路和方法有可能进一步应用到食品科学领域新技术的研究和开发。本研究以木糖氧化无色杆菌A22732为宿主,分离纯化得到三株烈性噬菌体,命名为phiAxp-1、phiAxp-2和phiAxp-3,对其生物学特性、最佳保存方法和基因组学进行研究,主要研究内容及结论如下:  1.噬菌体生物学特性  (1)噬菌体phiAxp-1噬菌斑直径在2-3 mm之间,通过透射电镜观察属于长尾噬菌体科。一步生长曲线显示,phiAxp-1的潜伏期约75 min,裂解期约15 min,爆发量为1742 pfu/cell。phiAxp-1在50℃处理75 min后,效价能保持同一数量级,处理温度越高,噬菌体失活越多;在pH为5-10的条件下,存活率都能有40%以上;当Ca2+、Mg2+浓度分别为10 mmol/L、15 mmol/L时,噬菌体的存活率最高;对低浓度(10%)的乙醇或异丙醇的耐受能力较强,中高浓度的乙醇或异丙醇处理后灭活明显。phiAxp-1的受体是A22732的脂多糖,提取A22732的脂多糖调节其浓度约为12.5μg/mL时, phiAxp-1的吸附效率下降到50%,脂多糖浓度增加到800μg/mL时,89.8%的phiAxp-1不能吸附A22732。  (2)噬菌体phiAxp-2噬菌斑直径在0.5-1 mm之间,通过透射电镜观察属于长尾噬菌体科。一步生长曲线显示,phiAxp-2的潜伏期约180 min,裂解期约60 min,爆发量为2985 pfu/cell。phiAxp-2在50℃处理75 min后,效价下降了1个数量级,处理温度越高,噬菌体灭活明显;在pH为5-10的条件下,存�

关 键 词: 木糖氧化无色杆菌 噬菌体 生物学特性 基因组学 抗生素 耐药性

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作者 杨世平

相关机构对象

机构 广东海洋大学

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