作 者: (戴应和); (张丽梅); (杨淑贤); (杨晓珺); (龙小琴); (袁经权); (易蔚); (曹丽);
机构地区: 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所
出 处: 《中国实验方剂学杂志》
摘 要: 目的:探讨松花粉对过氧化氢(H2O2)诱导人肝癌HepG2细胞应激性氧化损伤的保护作用。方法:将HepG2细胞分为正常组,H2O2模型组和样品干预组。样品干预组用不同浓度的松花粉预处理HepG2细胞12 h,H2O2模型组和样品干预组用400μmol·L-1过氧化氢氧化损伤细胞2 h,产生氧化应激损伤。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞活力;微板法检测细胞内活性氧(ROS),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测抗氧化通路中关键基因核因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1),谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCL)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达水平,以评价松花粉对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用。结果:MTT结果显示,与正常组比较,松花粉(80,40,20,10,5 mg·L-1)对HepG2细胞没有毒性;H2O2模型组中ROS,LDH及MDA的水平显著升高(P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01)。与H2O2模型组比较,松花粉干预组中ROS,LDH及MDA的水平显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著升高(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,松花粉显著上调Nrf2,HO-1和GCL的蛋白表达,并下调Keap1的蛋白表达。结论:质量浓度520 mg·L-1松花粉可有效保护400μmol·L-1H2O2对HepG2细胞应激性氧化损伤。其机制可能与调节SOD,GSH-Px活性,ROS,LDH,MDA水平有关,同时与调控抗氧化通路中关键基因Nrf2,Keap 1,HO-1,GCL蛋白的表达水平有关。
分 类 号: [R285]