中文会议： 广东省口腔医学会第三次会员代表大会暨第十次学术会议论文集

会议日期： 2011-03-01

会议地点： 广州

出版方 ： 广东省口腔医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中山大学

出　　处： 《广东省口腔医学会第三次会员代表大会暨第十次学术会议》

摘　　要： 目的：构建细胞分裂周期蛋白(Cdc6) RNAi慢病毒载体.方法：采用RNA干扰序列设计原则，设计5个靶向Cdc6的RNA干扰靶点序列，构建靶向Cdc6的RNA干扰载体，同时采用PCR方法从cDNA文库钓取目的基因Cde6构建Cdc6过表达载体.两种载体共转染293T细胞进行外源筛靶，采用Western blot检测Cdc6蛋白表达情况，判断不同靶点的干扰效果，选择两条最佳RNAi有效靶点序列，制备靶向Cdc6的慢病毒载体.结果：成功构建Cdc6 siRNA表达质粒及Cdc6过表达载体质粒，经外源筛靶实验显示各实验组较NC组对Cde6基因表达均能起到不同程度的敲减作用，其中Target 3和Target 4靶点对目的基因的表达有显著的敲减作用，敲减率分别为：69.15％和84.85％.结论：成功构建两条靶向Cdc6RNAi慢病毒载体：Target 3和Target 4.

关 键 词： 干扰 慢病毒载体

领　　域： [自动化与计算机技术] [自动化与计算机技术] [理学] [理学]