中文会议： 中关村全球农业生物技术创新论坛论文集

会议日期： 2011-11-18

会议地点： 北京

主办单位： 中国畜牧兽医学会,中国生物工程学会,中国植物保护学会

作　　者： ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院饲料研究所

出　　处： 《中关村全球农业生物技术创新论坛》

摘　　要： 为建立大豆球蛋白免疫检测方法及深入研究致敏机理提供基础材料，人工合成了大豆球蛋白ALA酸性多肽基因的CDNA序列，通过聚合酶链式反应(PCR)和BAM HI、KPN I双酶切构建了原核表达载体PET30A-ALA，将重组质粒转化大肠杆菌(E.COLI)BL21后用异丙基硫代-β-D-)．半乳糖苷(IPTG)诱导表达。SDS-PAGE分析表明，ALA酸性多肽融合蛋白能以可溶蛋白形式进行分泌表达，并且诱导5H后，A1A酸性多肽融合蛋白表达量达到最高。经HIS亲和层析纯化。获得纯度达90％的融合ALA蛋白，分子质量大小约为38KD。WESTERNBLOTTING显示，所获得的A1A融合蛋白能与对豆粕过敏的仔猪血清发生免疫反应，表明所获得融合蛋白具有免疫活性。

关 键 词： 大豆球蛋白 酸性多肽 原核表达

分 类 号： [S56 TQ6]

领　　域： [农业科学] [化学工程]