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禽流感病毒H5N1亚型HA基因的高效可溶表达及抗原性分析

中文会议: 中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

会议日期: 2006-10-01

会议地点: 长沙

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ; ;

机构地区: 华南农业大学动物科学学院

出  处: 《中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会》

摘  要: 本研究根据GENBANK公布的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA基因.将该片段定向插入到笔者所在实验室设计的原核表达载体PBCX中,构建重组表达载体PBCX-HA.将阳性质粒转化到大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE可检测到分子量约为94.7KU的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的22.5%.同时将重组表达质粒PET32A(+)-HA在同一条件下进行诱导表达,表达产物占菌体总蛋白的18.5%.经蛋白可溶性分析可看出,PBCX-HA融合蛋白主要以可溶形式存在.经WESTERN-BLOT证实,可溶表达的融合蛋白与H5N1 AⅣ阳性血清具有良好的免疫反应性.

关 键 词: 亚型 基因 高效可溶表达 禽流感病毒 抗原性分析

领  域: [农业科学]

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机构 中山大学
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