中文会议： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集

会议日期： 2008-09-01

会议地点： 大连

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

出　　处： 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会》

摘　　要： 本研究利用体内诱导抗原技术(IVIAT)对胸膜肺炎放线杆菌体内表达的基因进行了研究.首先将我们收集到的5份感染了APP1的猪血清混合,分别吸附体外培养的.APP1和大肠杆菌DE3的全菌及全菌的裂解物,以充分去除体外表达蛋白的抗体,经过该吸附过程后OD405分别由原来的0.927和0.239降低为0.196和0.078,表明混合血清得到了很好的吸附.同时,将APP1 基因组DNA以BSP1431进行酶切,回收500BP-2000BP的片段,与经过BAMHI酶切的ET30A/B/C进行连接,构建了APP1基因组质粒表达文库,库容量为2.0×105CFU,用吸附后的血清通过菌落原位免疫杂交来筛选该基因组表达文库,筛选了3000个菌落初步获得16个阳性克隆,通过再次筛选最后确定获得12个阳性克隆.本研究为抗病原菌药物、疫苗乃至新的诊断试剂的开发提供依据.

关 键 词： 猪病 胸膜肺炎放线杆菌 体内诱导抗原技术 菌落原位免疫杂交

分 类 号： [S]

领　　域： [农业科学]