中文会议： 首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会论文集

会议日期： 2008-11-30

会议地点： 天津

主办单位： 中国畜牧兽医学会,中国微生物学会,中国动物保健品协会

作　　者： ; ; ; ; ; ;

机构地区： 华南农业大学兽医学院

出　　处： 《首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会》

摘　　要： 为了研究狂犬病毒G基因在基因组不同位置所具有的功能差异，应用基因操作技术，将狂犬病毒HEP-FLURY株全基因组中G基因从原来的第四位重排至第二位，构建了重组病毒N1G2的全长感染性CDNA克隆，拯救出重组病毒N1G2。并在BHK-21细胞中传10代以上，使该重组病毒适应BHK-21细胞，测得其在BHK-21细胞中稳定传代滴度为106FFU/ML；运用RT-PCR及荧光抗体染色方法证实得到了稳定传代的重组病毒。 通过对重组病毒N1G2与RHEP-FLURY株生物学特性比较发现：两株病毒在BHK-21细胞中增殖至第四天滴度均达到最高，第五天滴度开始下降；将病毒处理后进行SDS-PAGE及薄层扫描，结果显示，RHEP-FLURY株G蛋白灰度值为15.057，重组病毒N1G2G蛋白灰度值为16.965，是前者的1.13倍，说明将G基因从第四位提前至第二位使G蛋白表达量增加；小鼠致病性实验说明：两种毒株对6周龄成鼠均无致死性，重组病毒N1G2株比RHEP-FLURY株对乳鼠半数致死量增大，病毒毒力降低。 结论：该实验得到了一个比HEP-FLURY疫苗株毒力更弱的重组病毒，为人类抗狂犬病提供了一个较好的后备疫苗株。

关 键 词： 反向遗传操作 狂犬病毒 株 基因重排 生物学特性 基因疫苗

领　　域： [农业科学]