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猪瘟病毒非结构蛋白NS2基因不同片段的克隆及在原核系统中的高效表达

中文会议: 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)

会议日期: 2004-09-11

会议地点: 北京

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ; ; ;

机构地区: 华中农业大学动物医学院

出  处: 《中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会》

摘  要: 参照猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株(HCLV)的基因组序列,设计并合成一组引物.从已构建含有猪瘟病毒兔化弱毒株全基因组质粒PMCFT1-6中分别扩增出NS2长1389BP和876BP的片段.将扩增的不同长度的NS2基因序列克隆至表达载体PGEX-KG中,经酶切鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃,1.0MMOL/L IPTG条件下诱导表达.大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE分析,在分子量约为40KDA处出现和预期的目的蛋白分子量相符的条带.WESTERN-BLOTTING检测表明,表达产物能与猪瘟病毒阳性血清发生特异性反应,出现单一反应带,该表达产物主要存在于包涵体中.上述结果为NS2基因表达产物在免疫检测中的进一步应用奠定了基础.

关 键 词: 猪瘟病毒 基因 原核表达 家畜病毒学 基因克隆

领  域: [农业科学]

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