中文会议： 中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)

会议日期： 2004-09-11

会议地点： 北京

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; (于康震）;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室

出　　处： 《中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会》

摘　　要： CAGGS含鸡β-ACTIN启动子和CMV增强子,是一种高效真核表达载体.将A/GOOSE/GUANGDONG/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入PCAGGS,构建了DNA疫苗质粒PCAGGHA,将PCAGGHA和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒PCIHA分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24-48小时293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白,WESTERN-BLOT证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果载体PCAGGS表达水平显著高于载体PCI.为进一步评估不同表达载体对H5亚型禽流感DNA疫苗免疫效果的影响,DNA疫苗质粒PCIHA及PCAGGHA分别以100μG和10μG剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后分别用100LD<,50>的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击.结果,100μG PCAGGHA可形成100﹪的免疫保护,100μG PCIHA可形成50﹪的免疫保护;10μG PCAGGHA可形成对免疫鸡100﹪的免疫保护,而10μG PCIHA则基本不能形成免疫保护;PCAGGHA诱导的HI抗体水平远远高于PCIHA.试验结果表明,鸡β-ACTIN启动子表达载体PCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果.

关 键 词： 禽流感 亚型 疫苗 免疫保护 表达载体

领　　域： [农业科学]