中文会议： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会论文集

会议日期： 2010-10-01

会议地点： 郑州

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ;

机构地区： 华南农业大学兽医学院

出　　处： 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会》

摘　　要： 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)MRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行，对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组MRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(CS-B)及其介导的LEADER-BODY结合位置，结果发现PRRSV MRNA分子的转录可使用经典(CANONICAL)及非经典(NONCANONICAL)TRS-B进行。通过对PRRSV感染性克隆PAPRRS进行定点基因突变及其所致拯救病毒的鉴定，以此确定TRS-L和TRS-B突变对亚基因组转录及病毒感染性的影响。结果表明：(1)同时突变TRS-L最后两个CC的全长突变体PLGAGLERD对MARC-145细胞无感染性，且未产生SGMRNA7转录本;而只突变最后一个C的PLEADERR能拯救出突变病毒，但突变位点在突变病毒系列传代中发生回复突变，由此证明TRS-L 3’的一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有一定修复功能。(2)突变TRS123 3’最后两个碱基的PM7DA或突变TRS93’最后两个碱基的PM7DB均能拯救出病毒，而共同含有TRS9和TRS123 3’最后两个碱基突变的PM7DABR不能拯救出病毒，对拯救的突变病毒进行鉴定发现，TRS123突变的拯救病毒在一系列传代中突变碱基回复，而TRS9突变的拯救病毒传代过程中稳定遗传;突变体PM7S3(含有TRS123的三个碱基突变)和PM7DB虽能拯救出活病毒，但突变都使相应的SGMRNA7转录量至零，且VM7S3滴度偏低。由此证明了TRS9和TRS123都可单独承担PRRSVSGMRNA7的转录调控及其3’一级序列对不连续性转录起着重要作用且PRRSV具有修复功能;PRRSV的N蛋白主要来源于SGMRNA7．1的翻译。(3)所有突变病毒的亚基因组中LEADER-BODY结合位点础基均来源于TRS-B，为负链RNA不连续转录模型理论提供直接证据。

分 类 号： [S85 S82]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学]