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新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用

中文会议: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集

会议日期: 2010-08-01

会议地点: 哈尔滨

主办单位: 中国畜牧兽医学会

出版方 : 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会、中国免疫学会兽医免疫分会

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 华南农业大学兽医学院

出  处: 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会》

摘  要: 本研究针对布鲁氏菌种特异的OMP25基因建立了一种布鲁氏菌的新型可视化环等温扩增FLOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION,LAMP)检测方法。应用该方法对布鲁氏菌S19株、S2株、M5株3株弱毒株进行检测均显示阳性结果,作为对照的大肠杆菌、沙门氏菌、八叠球菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、军团菌、枯草杆菌及溶血性链球菌均显示阴性结果。扩增产物电泳图谱及ALU I酶切分析验证了LAMP产物的特异性。敏感性试验显示,该方法扩增布鲁氏菌基因组DNA的检测极限为10 PG。用该方法检测人工污染牛布鲁氏菌的牛奶样品,检测敏感性达5.2×103 CFU;且该方法方法还可以对感染布鲁氏菌小鼠的组织进行检测,为新型可视化LAMP方法的进一步应用奠定了基础。

关 键 词: 布鲁氏菌 可视化环等温扩增 诊断

领  域: [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学]

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相关机构对象

机构 华南师范大学教育信息技术学院
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