中文会议： 中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会论文集

会议日期： 2004-09-01

会议地点： 贵阳

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 华南农业大学兽医学院

出　　处： 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》

摘　　要： 针对禽流感病毒鹅分离株OR已知核酸序列,设计一对引物HABP1/HABP2,利用RT-PCR方法扩增其HA基因.PCR扩增的HA片段用限制性内切酶ClaI、SacⅡ在37℃酶切消化2h,回收纯化目的片段.用T4 DNA连接酶将回收的目的片段和经相同酶切回收处理的pPICZ<,α>C载体连接.在含25μL/mLZeocin<'TM>的LB培养基上筛选阳性克隆.结果表明:质粒PCR可扩增出约1.7kb的条带;质粒经ClaⅠ、SacⅡ双酶切后,可见约1.7kb和约3.6kb两条条带;质粒用BstxⅠ酶切可见约5.3kb的条带.用5'/3'AOX primers为引物进行测序,结果表明HA基因已正确插入pPICZ<,α>C载体中.

关 键 词： 表达载体 亚型 基因重组 禽流感病毒 鹅分离株

领　　域： [农业科学]